[发明专利]艰难梭菌抗体

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年8月22日提交的美国临时申请第61/526031号的优先权，该临时申请的内容以其整体通过引用并入本文。

技术领域

本发明涉及针对艰难梭菌毒素A的单克隆抗体，本发明还涉及用于治疗或预防脊椎动物受试者中细菌艰难梭菌感染的组合物和方法。提供的方法用于对脊椎动物受试者施用有效量的抗体以减少、消除或预防感染复发。提供了治疗或预防生物体中艰难梭菌感染的方法。

背景技术

艰难梭菌(C.difficile)是常见的医院病原体，并且是世界范围内住院患者的发病率和死亡率的主要原因。Kelly等人，New Eng.J.Med.，330:257-62，1994。广谱抗生素增加的使用和艰难梭菌异常毒性株的出现导致了这样的想法，即疫苗可能非常适合于减少与这种细菌有关的疾病和死亡。艰难梭菌几乎不具有传统的抗生素选择，并经常导致复发性疾病(占25%)。艰难梭菌每年仅在美国就导致约20,000人死亡，并导致约50,000例确诊感染。近日，产生更多毒素的毒性更强的艰难梭菌菌株已经出现，如B1/NAB1/027株，其还具有降低的甲硝唑敏感性。艰难梭菌的爆发迫使病房和部分医院关闭。随着老年人口的增加以及人口统计数据的变化，艰难梭菌将成为21世纪的一个主要的问题。艰难梭菌疾病的范围从无症状带菌者至轻度腹泻至暴发性伪膜性结肠炎。

艰难梭菌具有二相性（dimorphic）生命周期，借此其既以传染性且坚韧的孢子形式存在，又以具有代谢活性的产生毒素的营养细胞的形式存在。艰难梭菌相关疾病(CDAD)被认为是由营养细胞并且更具体是由两种毒素肠毒素毒素A和细胞毒素毒素B的作用而引起的。用于艰难梭菌的疫苗和疗法目前集中于毒素(A和B)、A和B的类毒素、A和B的重组片段和营养细胞表层蛋白(SLPA)。

毒素A是具有多个功能域的高分子量蛋白。该毒素被分成4个功能域：氨基末端的葡萄糖基转移酶，其修饰导致上皮细胞中细胞骨架调节异常的Rho样GTP酶；自催化半胱氨酸蛋白酶结构域；疏水跨膜序列和高度重复的羧基末端宿主细胞结合域。羧基末端结构域锚定毒素到肠上皮细胞上的宿主细胞糖受体，其启动了内化过程，借此递送氨基末端酶结构域到靶细胞的细胞质中。酶结构域和葡萄糖基转移酶活性的递送导致由中毒细胞的凋亡性细胞死亡引起的腹泻和炎症。

许多研究显示了抗毒素的抗体对影响疾病结果的重要性。研究还显示了血清抗毒素A抗体与对CDAD和复发的保护之间的相关性。这些研究产生了用于CDAD的毒素mAb疗法。

尽管取得了这些进步，仍未满足对于包括CDAD复发的预防的艰难梭菌相关感染的有效治疗和/或预防的需要。本发明提供了针对毒素A的小鼠和人源化抗体以满足这些需要和其它的需要。

发明内容

本发明提供了抗体或其抗原结合部分，其结合艰难梭菌(C.difficile)的毒素A。抗体或其抗原结合部分可结合于艰难梭菌毒素A的片段4上。

在一个实施方式中，本发明提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包括重链区和轻链区，其中重链区包含3个互补决定区(CDR)：CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别与SEQ ID NO：29、30和31中所述的氨基酸序列具有约80%至约100%的同源性，并且其中轻链区包含3个CDR：CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别与SEQ ID NO：21、22和23中所述的氨基酸序列具有约80%至约100%的同源性。

本发明还提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其结合艰难梭菌毒素A并包含重链区，其中重链区包含3个CDR：CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别与SEQ ID NO：29、30和31中所述的氨基酸序列具有约80%至约100%的同源性。

本发明进一步提供了分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其结合艰难梭菌毒素A并包含轻链区，其中轻链区包含3个CDR：CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别与SEQ ID NO：21、22和23中所述的氨基酸序列具有约80%至约100%的同源性。

抗体或其抗原结合部分可以具有小于约1×10^-11M的解离常数(KD)。抗体或者其抗原结合部分可以是人源化的或嵌合的。