[发明专利]从简单碳源合成ω-官能化的羧酸和羧酸酯的生物技术方法在审
| 申请号： | 201280050644.0 | 申请日： | 2012-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN103857793A | 公开（公告）日： | 2014-06-11 |
| 发明（设计）人： | S.沙费尔;N.德克;J.吉伦;H.赫格;T.哈斯;M.佩特;H-G.亨内曼;M.韦泽尔;M.福兰 | 申请（专利权）人： | 赢创德固赛有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N9/88;C12P1/04;C12N9/00 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 石克虎;林森 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 简单 碳源 合成 官能 羧酸 生物技术 方法 | ||
1.微生物，其具有第一种遗传修饰，从而相比于它的野生型，它能够从至少一种简单碳源形成更多的羧酸或羧酸酯，
其特征在于，所述微生物具有第二种遗传修饰，该遗传修饰包括所述微生物相比于它的野生型显示出至少一种酶E1的提高的活性，
所述酶E1催化羧酸或羧酸酯转化为对应的ω-羟基羧酸或ω-羟基-羧酸酯。
2.权利要求1的微生物，其特征在于所述酶E1选自组：
EC 1.14.15.3的E1a P450烷羟化酶和E1b AlkB烷羟化酶。
3.权利要求1或2的微生物，其特征在于第二种遗传修饰另外包含所述微生物具有选自以下酶的相比于它的野生型提高的活性：
酶E2，其催化ω-氧代羧酸或ω-氧代羧酸酯转化为对应的ω-氨基羧酸或ω-氨基羧酸酯，
酶E3，其催化α-酮基羧酸转化为氨基酸，
酶E4，其催化ω-羟基羧酸或ω-羟基羧酸酯转化为对应的ω-氧代羧酸或ω-氧代羧酸酯，和
酶E5，其催化ω-氧代羧酸或ω-氧代羧酸酯转化为对应的ω-羧基羧酸或ω-羧基羧酸酯。
4.前述权利要求中至少一项的微生物，其特征在于所述第二种遗传修饰包含选自E1E2E3、E1E2E3E4、E1E5和E1E4E5的酶的提高的活性的组合。
5.权利要求2-4中至少一项的微生物，其特征在于
所述酶E2为ω-转氨酶，
所述酶E3为EC 1.4.1.1的丙氨酸脱氢酶，
所述酶E4为EC 1.1.3.20的脂肪醇氧化酶、EC 1.1.99.-的AlkJ醇脱氢酶或EC 1.1.1.1或EC 1.1.1.2的醇脱氢酶，和
所述酶E5为EC 1.2.1.3、EC 1.2.1.4或EC 1.2.1.5的醛脱氢酶。
6.前述权利要求中至少一项的微生物，其特征在于所述酶E1为由alkBGT编码的来自恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）GPo1的烷单加氧酶和具有多肽序列的蛋白，其中多达60％的氨基酸残基相比于上述参考序列通过缺失、插入、取代或其组合而修饰，并且其仍具有至少50％的具有相应的、上文提及的参考序列的蛋白的活性。
7.前述权利要求中至少一项的微生物，其特征在于所述第二种遗传修饰另外包含所述微生物相比于它的野生型形成更多的alkL基因产物。
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