[发明专利]分离巨大戟醇的方法

说明书

发明领域

本发明涉及生物学、药学和医学领域。更具体地讲，本发明涉及从二萜酯和巨大戟醇酯的混合物中分离巨大戟醇的方法，更特别是当所述混合物来自植物、尤其是来自大戟(Euphorbia)属的种子、更尤其是来自续随子(E.lathyris)种的种子时。

现有技术

尽管巨大戟醇可通过化学合成得到，但是它们还是主要存在于大戟科(Euphorbiaceae)植物、尤其是具有催泻活性的那些变种中的化合物[Evans FJ和Kinghorn ADJ.Linn.Soc.Bot.(London)1977；74：23-35；Evans FJ和Taylor SE.有机天然产物化学的进展(In Progress in the Chemistry of Organic Natural Products)；Herz W,Grisebach H,Kirby GW,Eds.；Springer：纽约，1983；44:1-99]。具体地讲，巨大戟醇(C₂₀H₂₈O₅)(CAS登记号30220-46-3)(式1)已被从续随子(Euphorbia lathyris L.)种植物(通常称为大戟(spurge))的种子分离得到。大戟种子油在世界上的不同国家上市，且因为其用于许多产品例如油漆、牙科用腔洞衬料、化妆品、润滑剂、塑料、生物柴油等的组合物中，所以其是化学工业中的重要原料。

巨大戟醇(Ingenol)(式1)

Me：本说明书中为CH₃

由于其重要的生物活性，对巨大戟醇化合物及其衍生物的巨大兴趣在近几年已得到提升。无论是天然的还是通过半合成得到的，一些巨大戟醇类并尤其是在3’位酯化的衍生物显示有效的抗癌和抗病毒活性[Ogbourne SM等人.Cancer Res2004；64：2833-9；Benhadji KA等人.Br J Cancer.2008；99(11)：1808-15；Kedei N等人.Cancer Res.2004；64(9)：3243-55；Warrilow D等人，AIDS Res Hum Retroviruses.2006；22(9)：854-64；Fujiwara M等人，Antimicrob Agents Chemother.1996；40(1)：271-3]。半合成可理解为从含有巨大戟醇的植物中分离巨大戟醇，且通过适当的化学反应，取代分子结构中的各基团，产生感兴趣的不同衍生物。所述显示生物活性并可用于临床实践的3’位酯化的衍生物优选是巨大戟醇-3-顺芷酸酯(式II)和巨大戟醇-3-当归酸酯(式III)。

巨大戟醇-3-顺芷酸酯

(式II)

巨大戟醇-3-当归酸酯

(式III)

在植物和植物提取物中，巨大戟醇以酯形式与二萜酯存在于混合物中。然而，大戟种子是分离巨大戟醇的唯一商业源，利用不同的化学方法，从其得到用于临床实践的生物活性巨大戟醇衍生物是可能的。所述种子具有复杂的基质(matrix)，除脂肪(40-47%)和蛋白质(15%)[Duke,J.D.Handbook of Energy Crops http://www.hort.purdue.edu/newcrop)]之外，该基质包含称为L₁-L₉大戟因子的一系列二萜酯，该二萜酯中含少量但相对恒定量的巨大戟醇单酯(L₄、L₅和L₆)[Adolf W和Hecker EZ.Krebsforsch.1975，84，325-344]，与含有其他类型二萜的级分(fraction)相比，含有巨大戟醇的级分是较少量的。巨大戟醇酯是强毒性的，构成强刺激性油，并且尽管单独的以游离形式分到的巨大戟醇是无害的，但从所述酯分离巨大戟醇在技术上是复杂的，且由于巨大戟醇酯级分的上述毒性，分离巨大戟醇对从事所述分离操作的操作者的健康不是无风险的。