[发明专利]脱氢酶变体和编码它们的多核苷酸

权利要求书

1.一种3-HPDH变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置9、31、32、33、34、35以及36处的一个或多个（若干个）位置处包括取代；

其中该变体与SEQ ID NO:2、4、或6具有至少60%，例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、或至少99%序列一致性；并且其中该变体具有3-HPDH活性。

2.如权利要求1所述的变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置9的位置处包括取代。

3.如权利要求1或2所述的变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置9的位置处包括Gly。

4.如权利要求1-3中任一项所述的变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置31的位置处包括取代。

5.如权利要求1-4中任一项所述的变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置31的位置处包括Asp或Glu。

6.如权利要求1-5中任一项所述的变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置32的位置处包括取代。

7.如权利要求1-6中任一项所述的变体，在对应于SEQ ID NO:2的位置32的位置处包括Leu。

8.如权利要求1-7中任一项所述的变体，其中该变体包括SEQ ID NO：7、8、9、10、11、12、13、14、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、80、或81或由其组成。

9.如权利要求1-8中任一项所述的变体，其中与NADP(H)相比，该变体对NAD(H)具有增加的特异性（例如，与NADP(H)相比，针对NAD(H)的大于2倍、5倍、10倍、20倍、50倍、100倍、200倍、500倍、或1000倍的特异性）。

10.一种具有3-HPDH活性的多肽，其中该多肽与SEQ ID NO:2、4、或6具有至少60%，例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、或至少99%序列一致性；并且其中与NADP(H)相比，该多肽对NAD(H)具有增加的特异性。

11.一种分离的多核苷酸，该多核苷酸编码如权利要求1-10中任一项所述的变体或多肽。

12.一种包括主动3-HP途径以及异源多核苷酸的宿主细胞,该异源多核苷酸编码具有3-HPDH活性的3-HPDH变体，

其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置9、31、32、33、34、35以及36的一个或多个（若干个）位置处包括取代；并且

其中该变体与SEQ ID NO:2、4、或6具有至少60%，例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、或至少99%序列一致性。

13.如权利要求12所述的宿主细胞，其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置9的位置处包括取代。

14.如权利要求12或13所述的宿主细胞，其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置9的位置处包括Gly。

15.如权利要求12-14中任一项所述的宿主细胞，其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置31的位置处包括取代。

16.如权利要求12-15中任一项所述的宿主细胞，其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置31的位置处包括Asp或Glu。

17.如权利要求12-16中任一项所述的宿主细胞，其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置32的位置处包括取代。

18.如权利要求12-17中任一项所述的宿主细胞，其中该变体在对应于SEQ ID NO:2的位置32的位置处包括Leu。