[发明专利]植物中DHA和其它LC‑PUFA的生成

权利要求书

1.一种生成包含可检测量的DHA(二十二碳六烯酸(C22:6,n-3))，DPA(二十二碳五烯酸(C22:5,n-6或n-3))或EPA(二十碳五烯酸(C20:5,n-3))的经遗传修饰的大豆植物细胞的方法，该方法包括用

包含多核苷酸的核酸分子，所述多核苷酸具有与SEQ ID NO:6至少80％相同的核苷酸序列，该多核苷酸编码生成至少一种多不饱和脂肪酸(PUFA)系统的多不饱和脂肪酸(PUFA)合酶的第一部分，其中所述PUFA合酶系统的第一部分由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成；

包含多核苷酸的核酸分子，所述多核苷酸具有与SEQ ID NO:7至少80％相同的核苷酸序列，该多核苷酸编码所述PUFA合酶系统的第二部分，其中所述PUFA合酶系统的第二部分由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成；

包含多核苷酸的核酸分子，所述多核苷酸具有与SEQ ID NO:8至少80％相同的核苷酸序列，该多核苷酸编码所述PUFA合酶系统的第三部分，其中所述PUFA合酶系统的第三部分由SEQ ID NO:3的氨基酸序列组成；

包含多核苷酸的核酸分子，所述多核苷酸具有与SEQ ID NO:10至少80％相同的核苷酸序列，所述多核苷酸编码将磷酸泛酰巯基乙胺基辅因子转移至PUFA合酶系统ACP域的磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPT酶)，其中所述PPT酶由SEQ ID NO:5的氨基酸序列组成；和

包含多核苷酸的核酸分子，所述多核苷酸具有与SEQ ID NO:9至少80％相同的核苷酸序列，该多核苷酸编码乙酰-CoA合成酶(AcoAS)，其中所述AcoAS由SEQ ID NO:4的氨基酸序列组成；

转化大豆植物或植物细胞，

使得经转化的植物细胞包含可检测量的DHA(二十二碳六烯酸(C22:6,n-3))，DPA(二十二碳五烯酸(C22:5,n-6或n-3))或EPA(二十碳五烯酸(C20:5,n-3))。

2.权利要求1的方法，其中编码PUFA合酶系统的第一部分的多核苷酸是SEQ ID NO:6。

3.权利要求1的方法，其中编码PUFA合酶系统的第二部分的多核苷酸是SEQ ID NO:7。

4.权利要求1的方法，其中编码PUFA合酶系统的第三部分的多核苷酸是SEQ ID NO:8。

5.权利要求1的方法，其中编码PUFA合酶系统的第一部分的多核苷酸是SEQ ID NO:6，编码PUFA合酶系统的第二部分的多核苷酸是SEQ ID NO:7，编码PUFA合酶系统的第三部分的多核苷酸是SEQ ID NO:8。

6.前述权利要求中任一项的方法，其中编码PPT酶的多核苷酸是SEQ ID NO:10。

7.前述权利要求中任一项的方法，其中编码PUFA合酶系统的各部分的多核苷酸和编码PPT酶的多核苷酸包含在单一重组表达载体中。

8.前述权利要求中任一项的方法，其中编码PUFA合酶系统的各部分的多核苷酸、编码PPT酶的多核苷酸、和编码ACoAS的多核苷酸各自与种子特异性启动子或叶特异性启动子可操作连接。

9.权利要求8的方法，其中所述启动子选自下组：PvDlec2、LfKCS3、FAE 1、BoACP、BnaNapinC、泛素和CsVMV启动子。

10.权利要求1的方法，其中编码ACoAS的多核苷酸是SEQ ID NO:9。

11.前述权利要求中任一项的方法，其中编码PUFA合酶系统的各部分的多核苷酸、编码PPT酶的多核苷酸、所述编码ACoAS的多核苷酸包含在单一重组表达载体中。

12.前述权利要求中任一项的方法，其进一步包括用编码乙酰CoA羧化酶(ACC酶)的多核苷酸或编码2型二酰基甘油酰基转移酶(DGAT2)的多核苷酸转化所述大豆植物或植物细胞。