[发明专利]AXMI279杀虫基因及其使用方法

说明书

在此提供了用于赋予针对细菌、植物、植物细胞、组织、以及种子的杀虫活性的组合物和方法。提供了包含针对杀虫多肽的编码序列的组合物。这些编码序列可以用在DNA构建体或表达盒中，以便用于在植物和细菌中转化和表达。组合物还包含转化的细菌、植物、植物细胞、组织、以及种子。具体地说，提供了分离的杀虫核酸分子。另外，涵盖了与这些多核苷酸相应的氨基酸序列。具体地说，本发明提供了多种核酸分子，这些核酸分子包含编码SEQ ID NO:2、3、或4中所示的氨基酸序列的核苷酸序列、在SEQ ID NO:1中列出的核苷酸序列、以及它们的变体和片段。

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年7月29日提交的美国临时申请序列号61/513,088的权益，该申请的内容通过引用以其全部内容结合在此。

电子提交的序列表的引用

该序列表的官方副本经由EFS-Web作为ASCII格式序列表来以电子方式提交，文件名为“APA116004SEQLIST.TXT”，创建于2012年7月19日并且具有26.9千字节大小，并且与本说明书同时提交。包含在这一ASCII格式文件中的序列表是本说明书的一部分并且通过引用以其全部内容结合在此。

发明领域

本发明涉及分子生物学领域。提供了编码杀虫蛋白的新颖的基因。这些蛋白质和编码它们的这些核酸序列在制备杀虫制剂以及在生产转基因抗害虫植物中是有用的。

发明背景

DDT（二氯-二苯基-三氯乙烷）的引入以及以及随后不加选择的使用合成化学杀昆虫剂的趋向导致了水和食品来源的污染、对非目标的有益昆虫的毒害、以及昆虫害虫发展对这些化学杀昆虫剂的抗性。关于不加选择的使用化学杀昆虫剂的不利环境影响的日益增加的公众关注促进了对用于昆虫害虫控制的替代方法的探索。

这些有希望的替代方案之一是使用生物控制剂。对于Bt（苏云金芽孢杆菌（B.thuringiensis），一种革兰氏阳性土壤细菌）作为有效生物杀虫剂的安全应用是具有充分的历史记录的，并且一种或多种δ-内毒素基因在农作物植物中表达的多个报告是可用的。Bt转基因农作物仅需要少量的杀昆虫喷雾剂，这不仅节约成本和时间，而且降低了健康风险。在一些情况下，昆虫可以发展出对不同杀昆虫化合物的抗性，这增加了对鉴定用于害虫控制的替代生物控制剂的需要。

发明概述

提供了用于赋予针对细菌、植物、植物细胞、组织、以及种子的杀虫活性的组合物和方法。组合物包括针对杀虫（pesticidal）的和杀昆虫（insectidal）多肽的核酸分子编码序列、包括那些核酸分子的载体、以及包括这些载体的宿主细胞。组合物还包括这些杀虫多肽序列以及针对那些多肽的抗体。这些核苷酸序列可以在DNA构建体或表达盒中，以用于在多种生物（包括微生物和植物）中进行转化和表达。这些核苷酸或氨基酸序列可以是合成序列，这些合成序列已经被设计为用于在一种生物中表达，该生物包括但不局限于：一种微生物或一种植物。组合物还包含含有本发明的核苷酸序列的转化的细菌、植物、植物细胞、组织、以及种子。

具体地说，提供了编码一种杀虫蛋白的分离或重组的核酸分子。另外，涵盖了与这些杀虫蛋白相应的氨基酸序列。具体地，本发明提供了一种分离或重组的核酸分子，该核酸分子包括编码SEQ ID NO:2、3、或4中所示的氨基酸序列的核苷酸序列、或在SEQ ID NO:1中列出的核苷酸序列、以及它们的生物活性变体和片段。还涵盖了与本发明的核苷酸序列互补的核苷酸序列、或与本发明的序列或其互补物杂交的核苷酸序列。另外还提供了包含本发明的这些核苷酸序列或者编码本发明的这些氨基酸序列的核苷酸序列以及它们的生物活性变体和片段的载体、宿主细胞、植物以及种子。还涵盖了编码在此披露的多肽的合成核苷酸序列。

提供了用于产生本发明的多肽的方法、以及用于使用这些多肽来控制或杀死鳞翅目、鞘翅目、线虫、或双翅目害虫的方法。还包括用于检测在样品中的本发明的这些核酸和多肽的方法和试剂盒。