[发明专利]用于制备进行检查的细胞学样品的系统和试剂盒

说明书

发明领域

本发明涉及细胞学样品的显微镜检查领域。

发明背景

子宫颈癌在全世界的女性中是第二位最常见的癌症，在发展中国家是导致女性因癌症死亡的主要因素。妇女中有大约30%的癌症是子宫颈癌，例如在印度每年诊断超过100,000个新病例。子宫颈癌病例的预计年复合增长率(CAGR)是2.56%，以这个增长速度在2012年将检测到大约175,000例的子宫颈癌新病例。

筛查子宫颈癌的一种推荐工具是在帕帕尼科拉乌测试(Papanicolaou test)(也称作Pap-涂片、Pap-试验、宫颈涂片或者涂片试验)中检测癌症的细胞学前体，这是用于妇科学中的一种筛查检查，用以检测子宫颈管特别是变性带中的恶化前和恶性病变。

在取Pap涂片时，使用阴道窥器从子宫颈的外口和宫颈内膜取细胞。在显微镜下检查细胞以观察异常情况。该测试目的在于检测由性传播人乳头瘤病毒导致的潜在的癌前改变。该测试仍然是早期检测癌前和子宫颈癌的一种有效的广泛使用的方法。该测试还可检测宫颈内膜和子宫内膜中的感染和异常。

这种方法在发达国家有效地降低了子宫颈癌的发生率。然而，目前的Pap染色是冗长且耗时的。此外，需要的步骤数和方法学使其整个过程非常难以自动化，而且难以在床旁(point of care setting)实施，这意味着样品不能在床旁分析，必须送至实验室分析。

发明概述

根据本发明的第一方面，提供了用于制备进行检查的细胞学样品的系统或者试剂盒。所述系统或者试剂盒包含固定所述样品中包含的细胞的固定剂，修饰所述样品中包含的细胞表面的细胞表面修饰剂，具有至少两个面的第一样品支持装置，及具有至少两个面的第二样品支持装置，其中至少一个支持装置的至少一个面上沉积有细胞质染料或者核染料。

如本文所用，“细胞学样品”被定义为来自生物体、优选哺乳动物的数量足够进行鉴别和/或分析的任何样品。细胞学样品非限制性例子包括细胞样品、皮肤样品、组织样品和粘膜样品。

如本文所用，术语“固定剂”是指一种组合物，其可以是或者不是液体形式，其固定细胞学样品，由此使所述细胞学样品被附着于载玻片足够的时间以鉴别和/或分析该细胞学样品。

如本文所用，术语“细胞表面修饰”是指处理细胞，由此细胞是非折叠的和/或非卷曲的，和/或细胞重叠减少。在样品制备期间细胞折叠和卷曲的减少将增强细胞和形态学细节的观测，用于随后检测样品中的异常细胞，例如在子宫颈癌筛查中。

细胞重叠的减少将改善细胞分散，这特别在细胞悬浮液中是重要问题，在细胞悬浮液中细胞趋于彼此重叠，特别是非常小的并趋于聚集及位于大细胞上的多形性。一般地，这两个目的都可以通过增加细胞的表面电荷实现，使得各个细胞之间排斥增加及因此提供更好的分散。

核染色是当样品沉积在所述第一样品支持装置上或者由所述第一样品支持装置覆盖时对样品中包含的细胞的细胞核染色。细胞质染色是当样品沉积在所述第二样品支持装置上或者由所述第二样品支持装置覆盖时对样品中包含的细胞的细胞质染色。

这种系统或试剂盒提供了制备细胞学样品的选项，由此样品中的细胞以适于通过显微镜观测或者适于通过自动化光学细胞分析装置分析的形式分散。因此，本发明的一个重要特征是可以对指定样品进行现场染色，即即时(Point of Care)分析。此外，不再需要在该位点制备染色溶液，因为染料以合适量预先分布在样品支持装置上。进一步地，不再需要进行复杂的方案和多步骤染色程序，并且在染色期间基本上由于灰尘和杂质所致的污染问题也被消除。再者，由于染料是以最佳染色需要的精确量分布的事实也使得例如过度染色或者染色不足等偏差最小化。

另一优势是pH条件可以容易控制，这是细胞质染色(在一些情况中酸性pH是有利的)及核染色(在一些情况中碱性pH是有利的)必需的。

其上已经沉积有染料的样品支持装置的使用使得可以在密闭环境中进行染色，即在样品筒(cartridge)中，这进一步消除了灰尘和杂质并增加了染色程序的可再现性。

在一个优选的实施方案中，提供了第一和/或第二样品支持装置的仅一个面具有各自的染料。然而，可以有利的是第一和/或第二样品支持装置的两个面均具有染料，在这种情况中，技术人员操作该系统时不需要考虑该支持装置的哪个面面对样品。在这种实施方案中，避免了由于使用第一和/或第二样品支持装置的错误面所致人为假象。

根据本发明的第二方面，提供了一种制备进行检查的细胞学样品的方法，所述方法包括如下步骤：

用固定剂固定所述样品中包含的细胞，