[发明专利]抗WT1抗体的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用WT1片段的、测定被检测体中的抗WT1抗体的方法。

背景技术

WT1基因（Wilms tumor gene）是作为Wilms肾肿瘤的致病基因被分离的锌指（zinc finger）型的转录因子。其后，在以急性骨髓系白血病为首的各种实体癌中也发现了WT1基因的异常的高表达（非专利文献1-3）。因此，已经开始尝试将WT1蛋白质作为肽疫苗进行应用。

另外，近年已明确WT1蛋白质具有由抑制区域（repression domein）、活化区域（activation domein）以及属于DNA结合区域的锌指区域（Zinc finger domain）组成的结构，其与EGR-1（Early Growth Response Protein1；初期增殖应答蛋白1）部位结合，进行基因的表达调节，并且，还报道有其具有作为癌抑制基因的功能（非专利文献4和5）。

另一方面，已表明也存在对WT1蛋白质的自身抗体。已报道特别是在血液癌、肺癌（小细胞癌）中，患者血液中的对WT1蛋白质的自身抗体值高（非专利文献6-8）。另外，报道有对于WT1mRNA而言，表达越高越具有预后不良的倾向，与此相对，对于抗WT1抗体而言，血中浓度越高越显示预后良好的倾向（非专利文献7）。因此，被认为正确测定患者血中的抗WT1抗体，对于治疗法的选择或者治疗经过的监测是有用的，例如，已报道有将含有抑制区域和活化区域且缺少锌指的WT1蛋白质作为抗原来测定抗WT1抗体的技术（专利文献1和2）。

但是，将生物体内蛋白质作为异物进行识别，形成自身抗体的机制尚不明确，而且其抗体量微少，还未确立以高灵敏度检测自身抗体的方法。关于抗WT1抗体，目前为止的使用WT1蛋白质抗原的方法中，检测抗体的抗体值的分布狭窄，存在未必能正确进行评价的问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:日本特开2002-48793号公报

专利文献2:日本特开2006-267124号公报

非专利文献

非专利文献1:Inoue K，Sugiyama H，Ogawa H，et al.WT1as a new prognostic factor and new marker for the detection of minimal residual disease in acute leukemia.Blood1994;84:3071-9

非专利文献2:Oji Y，Miyoshi S，Maeda H，et al.Overexpression of the Wilms'tumor gene WT1in de novo lung cancers.Int J Cancer2002;100:297-303

非专利文献3:Miyoshi Y，Ando A，Egawa C，et al.High expression of Wilms'tumor suppressor gene predicts poor prognosis in breast cancer patients.Clin Cancer Res2002;8:1167-71

非专利文献4:Haber DA，Sohn RL，Buckler AJ，et al.Alternative splicing and genomic structure of the Wilms'tumor gene WTl.Proc Natl Acad Sci USA88;9618:1991

非专利文献5:Madden SL，Cook DM，Morris JF，et al.Transcriptional repression mediated by the WTI Wilms tumor gene product.Science2.53;1550:1991

非专利文献6:Olga AEl，Oka Y，Tsuboi A，et al.Humoral immune responses againstWilms tumor gene WT1product in patients with hematopoietic malignancies.Blood2002;99:3272-3279