[发明专利]用于诊断和治疗单纯疱疹病毒1和2型的蛋白质抗原的方法和组合物

说明书

本申请要求2011年7月1日提交的具有流水号61/503790的我们悬而未决的美国临时申请的优先权。

发明领域

本发明的领域是涉及单纯疱疹的选择抗原的组合物和方法，尤其由于它们涉及其在诊断、治疗和治疗性组合物中的用途。

发明背景

单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是能够感染哺乳动物和禽类两者的病毒。HSV1和2型是人发病率的重大原因。HSV-2是性传播的，并且是大多数复发性生殖器疱疹损伤的成因剂。HSV-2感染与升高的妊娠风险有关，所述妊娠风险包括自然流产，早产，和病毒对新生儿的先天性感染。另外，HSV-2的感染在暴露于HIV时也与升高的感染风险有关。不幸地，HSV-2感染经常是无症状的，并且大多数受感染的个体不知道他们被感染。对HSV-2状态的这种无知是传播给未感染配偶的主要促成因素。比较而言，HSV-1通常在童年期间传播，并且主要与导致“感冒疮(cold sores)”的口唇(orolabial)感染有关。然而，HSV-1可以引起角膜感染，其可以导致失明。不幸地，损伤的此种差别分布不足以区别HSV-1和HSV-2。

HSV-1和HSV-2两者都在其宿主中建立终身的潜在性感染。这些感染以感染的周期性再活化和所得的病毒脱落为特征。由于HSV-1和HSV-2感染的不同天然史和后果，精确诊断HSV型对于患者管理和预后，以及对于控制潜在传播是重要的。例如，知道特定的HSV型可以帮助患者采取适当的防范以防止疾病传播给他人。具体地，未被认出的HSV-2感染的鉴定可以用于注意监测妊娠期间的病毒脱落，由此使先天性感染的风险最小化。

作为HSV定型(typing)的其它复杂情况，HSV-1和HSV-2显示紧密的氨基酸序列同源性，因此展现出广泛的抗原性交叉反应性。少数抗原是足够趋异的，使得它们容许区别HSV-1和HSV-2感染，尽管仅HSV-1和-2的US4/糖蛋白G(gG)足够趋异以提供有用的灵敏性和特异性参数。目前的诊断方法包括酶联免疫测定法(ELISA)、荧光免疫测定法(FIA)，及类似的测试形式。一种此类测试记载于美国专利No.6,265,176，其中表征了患者抗体对固定化HSV抗原的结合。此类测试一般表征患者对病毒的免疫应答，并且因此经常利用来自HSV-1和HSV-2的重组抗原。例如，EP1 982 993 A2描述了多聚体融合肽的用途，所述多聚体融合肽掺入糖蛋白G的部分以检测HSV-1和HSV-2。本文中讨论的这些和所有其它外来材料通过提及完整并入。在并入参考文献中的定义或术语的使用与本文中提供的所述术语的定义不一致或矛盾的情况中，适用本文中提供的所述术语的定义，并且参考文献中的所述术语的定义不适用。目前，得到FDA批准的唯一测试基于gG-1和gG-2反应性。含糊的结果在此类测试基于单一诊断性抗原的使用时是常见的，因为不同的感染患者可以具有不同水平的免疫应答。虽然基于gG的测试显示卓越的特异性，就像任何单一抗原测试一样，但是有风险从仅缺乏针对gG的抗体的感染个体获得假阴性结果。因此，随访测试，诸如全病毒Western印迹可能是精确诊断需要的。不幸地，目前的测试方法仅产生部分有用的结果。此类部分表征的平台上的测试性能广泛变化，并且交叉反应性可以容易地从此类复杂混合物产生假阳性结果。

响应HIV感染的高流行性和潜在负面后果，已经尝试开发疫苗。此类开发需要鉴定不仅对HSV特异性，而且还具有抗原性且能够产生保护性免疫应答的抗原。例如，美国专利申请No.2004/241182A1公开了HSV-2蛋白，其鉴定为有抗原性且筛选T细胞活化以用于疫苗。类似地，EP2 272 859 A2描述了与佐剂一起使用HSV-2肽，所述佐剂选择为诱导Th1型免疫应答。WO2004/026265A2中描述了不同的办法，其利用在引入哺乳动物中时导致肽表达的遗传构建体。此类遗传构建体从HSV-1序列文库生成，以诱导免疫应答。后续用HSV-1对动物的攻击用于鉴定产生保护性免疫应答的构建体。虽然此类办法在鉴定免疫原性且保护性抗原中具有至少一些效用，然而，其必需限于生成已经经历真核加工，例如糖基化和陪伴蛋白辅助折叠的肽和蛋白质。此类肽和蛋白质可能难以大规模生成，因为此类方法一般牵涉化学合成或使用容易培养的遗传修饰细菌。

因此，仍然存在对提供与HSV相关的诊断和治疗应用的抗原和抗体检测和监测的改善的组合物和方法的较大的、未满足的需要。

发明概述