[发明专利]借助磁性通流测量的单个分析物采集

说明书

技术领域

本发明涉及一种磁性标记的分析物的磁性通流测量，尤其是磁性流式细胞术。

背景技术

在磁流式细胞术术中截至目前使用两种方式进行单个细胞检测，在其中如下绕开在清楚地分离两个直接相继的细胞时出现的问题：

例如源自Loureiro等所著的“Journal of Applied Physics”,2011,109,07B311中所公知的，超顺磁性标记的细胞分析物由磁阻传感器采集。虽然通过放弃积聚所标记的细胞从而细胞没有被很高地浓缩，但是这导致同样地非常小的复得率（Wiederfindungsrate），也即是说从整体上仅仅有低百分比的所标记细胞可以被磁阻传感器采集。

替代地在现有技术中以稀释的样本进行处理。借助减小细胞悬浮液的浓度并结合积聚磁性标记的细胞而扩大了距离，并且细胞可以单个地被引导经过传感器，然而由此非常不利地导致不希望的测量时间延长。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，以高的复得率和短的测量时间提供单个细胞检测。

所述技术问题通过根据权利要求1所述的方法来解决。本发明的具有优势的构造是从属权利要求的主题。

根据本发明的用于分析物的磁性通流测量的方法包括以下步骤：

首先进行样本中的分析物的磁性标记。然后生成分析物的流动，所述分析物被引导经过传感器装置，其中所述分析物的流动在此至少被引导通过磁阻部件。此外生成磁性梯度场，借助该磁性梯度场，所标记的分析物在磁阻部件上积聚，还生成均匀磁场，其相对于磁阻部件延伸为使得所述均匀磁场不被磁阻部件采集。借助带有至少一个磁阻部件的传感器装置进行单个标记的分析物的采集。在此所述磁性标记在根据本发明的方法中进行为使得所标记的分析物在均匀磁场中分别引起磁性杂散场，所述杂散场的可采集的最大值与分析物中心的距离小于流体动力学的分析物半径。

为了生成磁性梯度场以及均匀磁场尤其仅仅需要一个磁性单元，其满足双重功能。在与磁性单元的更大距离中，该磁性单元生成梯度场用于磁性标记的分析物的积聚。然而在磁性单元的近处磁场线均匀分布。所述磁性单元在此如此相对于传感器（也即是磁阻部件）布置，使得均匀磁场沿这样的方向分布，在该方向上传感器不敏感。这意味着例如，所述均匀磁场沿着z方向延伸，而传感器在与其垂直的x方向敏感。

通过磁性标记分析物而在均匀磁场中引起的杂散场是由磁阻部件采集的。尤其该杂散场的x-分量被测量，其中所述x方向被定义为通流方向，也就是说杂散场的与磁阻部件的表面平行的方向。该可采集的杂散场最大值确定与分析物中点的距离，其接下来也被称为磁性半径。通过分析物、例如细胞分析物的磁性标记或珠子，这些分析物可以具有磁性直径，其小于光学或流体动力学的直径，这意味着，x方向上的最大杂散场位于分析物环周内。由此和通过同样该杂散场的x-分量的检测，例如借助在该水平的x方向敏感的磁阻部件来检测，可以将对两个直接相继的细胞的检测作为两个独立事件来分离进行。

这些有如下优点，在其中分析物以最小可能的距离存在的高细胞浓度的情况下，单个地检测这些分析物，也即是真的能够解决所谓的单个事件。通过合适的磁性标记将标记的分析物的杂散场在竖向的外部磁场中如此影响，使得磁性的单独分析物检测的复得率被确保。

传感器装置可以尤其具有至少一个但也可以多个磁阻部件，也就是说单个阻抗。优选所述传感器装置具有磁阻性的单个阻抗，其例如连接在惠斯登测量桥中。如从专利申请DE102010040391.1中公知的，可以由此特别有利地生成特征信号曲线（Signalverlauf）。

在本发明的一个有利构造的情况下在所述方法中借助磁性纳米珠，尤其是超顺磁性的纳米珠进行磁性标记。所述纳米珠尤其具有介于10nm和500nm之间的流体动力学直径。分别根据待标记的分析物，例如根据细胞类型，它们的表面和/或表位数目（Epitopenanzahl）确定哪种大小和类型的标记是特别具有优势的。有介于10nm和500nm之间的直径的小纳米珠具有优点，即由此可以达到在分析物表面上的介于10%至90%的占领密度，其实现将杂散场最大值移位到分析物内部。尤其如此标记分析物（例如细胞），使得杂散场的x-分量的最大值位于距细胞中心介于50%至90%细胞半径处。

在本发明的另外具有优势的构造的情况下在所述方法中借助纳米珠进行磁性标记，其具有磁铁矿材料或磁赤铁矿材料。尤其用于磁化的纳米珠具有饱和磁化大约介于80至90emu/g之间的材料。