[发明专利]制备人松弛素-2的方法

权利要求书

1.一种用于制备具有以下氨基酸序列的人松弛素-2的方法：

A链：

pGlu-Leu-Tyr-Ser-Ala-Leu-Ala-Asn-Lys-Cys-Cys-His-Val-Gly-Cys-Thr-Lys-Arg-Ser-Leu-Ala-Arg-Phe-Cys

B链：

Asp-Ser-Trp-Met-Glu-Glu-Val-Ile-Lys-Leu-Cys-Gly-Arg-Glu-Leu-Val-Arg-Ala-Gln-Ile-Ala-Ile-Cys-Gly-Met-Ser-Thr-Trp-Ser;

包括以下步骤：

提供具有常规保护基团的合成A链和B链所需的氨基酸，其中，半胱氨酸用作三苯甲基保护的氨基酸(L-Cys(Trt)-OH)；

在固相合成之后实施链A和链B各自的色谱纯化；

接着在pH为7.9到8.4的碳酸氢铵缓冲液中同时折叠和结合各链A和链B；和

然后纯化形成的松弛素-2。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，使用以下氨基酸衍生物：Fmoc-L-Ala-OH、Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-L-Asn(Trt)-OH、Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-L-Glu(OtBu)、Fmoc-L-Cys(Trt)、Fmoc-L-Gln(Trt)、Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH、L-pGlu-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-L-His(Trt)、Fmoc-L-Ile-OH、Fmoc-L-Leu-OH、Fmoc-L-Lys(Boc)-OH、Fmoc-L-Met-OH、Fmoc-L-Phe-OH、Fmoc-L-Ser(tBu)-OH、Fmoc-L-Thr(tBu)-OH、Fmoc-L-Trp(Boc)、Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH、和Fmoc-L-Val-OH。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，预载有丝氨酸作为C末端的树脂载体，Fmoc保护的TentaGel R-PHP，用于B链的合成。

4.如权利要求1-3至少一项所述的方法，其特征在于，预载有Fmoc-L-Cys(Trt)作为C末端的树脂载体用于A链的合成。

5.一种药物，含有如权利要求1-4任一项获得的人松弛素-2以及常规的助剂和添加剂。

6.如权利要求5所述的药物，其为冻干形式，含有赋形剂，例如甘露醇。

7.如权利要求6所述的药物，在水性溶液中重建。

8.如权利要求5所述的药物，包封在脂质体内。

9.如权利要求8所述的药物，以水性溶液或膏剂形式应用，所述水性溶液包含包封在脂质体内的松弛素-2，所述膏剂包含包封在脂质体内的松弛素-2。

10.权利要求1到4任一项获得的松弛素-2用于治疗心血管、肺、肝和肾系统疾病，包括肺动脉高压、心肾综合征、以及肾脏和肝脏纤维化；

用于治疗急性和慢性心脏衰竭，包括舒张性心脏衰竭和心肌肥大；

用于治疗糖尿病和其并发症，特别是糖尿病中发生的肾脏和心脏损伤；

用于治疗增生性和炎症性心血管疾病，特别是内皮和血管的生长，和治疗外周动脉闭塞性疾病。