[发明专利]上皮性卵巢癌标志物检测用抗体和上皮性卵巢癌判定方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于检测上皮性卵巢癌标志物的抗β1,3-N-乙酰基葡萄糖胺转移酶3抗体、产生上述抗体的杂交瘤以及使用上述抗体的上皮性卵巢癌判定方法。

背景技术

卵巢癌与妇科癌中的乳癌、子宫癌相比是发生率低的癌，但是，近年其发生率、死亡率均有增加的倾向。通常由于卵巢癌基本没有发病初期阶段的主观症状，所以发现时大多其症状已经发展，因此，其预见性不良，成为妇科癌中死亡率最高的疾病。已知卵巢癌因发病部位不同，包括了由卵巢的表层上皮细胞产生的表层上皮性·间质性瘤（以下，称为“上皮性卵巢癌”）、由胚细胞产生的胚细胞瘤等。其中上皮性卵巢癌在全部卵巢癌中占约90%，特别是在40岁以后的中老年较为多见。因此，在早期阶段发现上皮性卵巢癌在该疾病的治疗上变得重要。

但是，由于卵巢是不与外界相接的脏器，不能像子宫那样不进行开腹或者穿孔即可通过内视镜进行检查或采取细胞。此外，上皮性卵巢癌如果不是在症状发展而卵巢出现肥大后，则通过触诊而发现其通常是困难的。因此，通常的检查·诊断方法中将上皮性卵巢癌漏诊的情况较多。虽然回声检查、MRI、CT等对上皮性卵巢癌的早期发现比较有效，但是存在检查自身是大规模的且检查费用是高额的，以及良性、恶性的诊断精度不是很高的问题。

鉴于上述背景，近年来肿瘤标志物受到瞩目。肿瘤标志物是指癌细胞产生的物质、或与癌细胞反应由周边的细胞产生的物质，由于其在体液中的存在量反映了肿瘤的有无、其预兆，因此成为癌判定和治疗方针决定等的鉴别子。此外，由于能够从体液进行检查，所以具有侵袭性比较低、检查也简便，费用也低廉等优点。

作为上皮性卵巢癌的肿瘤标志物，目前为止，已知由CA125、CA602、CA130、CA72-4、CA546、CA19-9、STN等蛋白质构成的肿瘤标志物（非专利文献1～6）。使用这些肿瘤标志物的癌判定方法中，通常是，测定健康人和上皮性卵巢癌患者的该肿瘤标志物在血清中的浓度，基于其量差来判定有无罹患癌。

但是，这些蛋白质包含如下特异性的问题，即，像CA125这样在子宫内膜症等癌以外的妇科良性疾病中显示阳性，像CA72-4、CA19-9和STN这样在卵巢癌以外的胃、大肠等各种消化器官癌中显示阳性等。此外，由于上皮性卵巢癌因组织类型不同进一步分类为浆液性、明细胞性、粘液性、和类内膜性，标志物的反应性因组织类型不同而不同，偶有发现不能完全反映癌的发展的问题。例如，CA125、CA602和CA546等卵巢癌标志物中，由于在粘液性卵巢癌中的阳性率低，所以存在即使该组织类型变为发展期也难以被检测出来等的问题。

专利文献1公开了将源自癌相关人群的半乳糖转移酶（GAT）作为肿瘤标志物的、用于诊断以卵巢癌为代表的癌的单克隆抗体，产生其的杂交瘤以及使用其的样本中的源自癌相关人群的半乳糖转移酶的测定方法。此外，专利文献2公开了将糖转移酶即β1,3-半乳糖转移酶5、β1,3-半乳糖转移酶4、和N-乙酰基葡萄糖胺6-O-硫酸转移酶2作为肿瘤标志物的在早期检测妇科癌的方法。上述专利文献1和2中作为肿瘤标志物使用的糖转移酶，是合成与糖蛋白质、糖脂或蛋白多糖等结合的糖链的酶，通常作为局限于高尔基体的膜蛋白质而固定在高尔基体膜上。因此，没有分泌到细胞外，因而在健康人的体液中基本没有被检测出来。但是，卵巢癌中，已知通过某种蛋白酶表达量的增加，糖转移酶被异常切断，并被排出到细胞外。其结果是，在体液中检测到有意义的量的糖转移酶片段。

专利文献1中的糖转移酶、β1,4-半乳糖转移酶在糖转移酶中表达量非常高，向细胞外的分泌量也较多。因此，健康人也显示约200ng/mL的血中浓度，仅通过酶活性无法判别良性疾病和癌。因此，专利文献1中，着眼于在卵巢癌细胞培养上清和卵巢癌患者腹水中存在被异常切断的该糖转移酶片段，通过使用仅识别该片段的抗体，尝试构筑卵巢癌特异性高的测定体系。但是，利用该测定体系的市售的临床诊断试剂盒中，存在即使健康女性也显示阳性的例子（非专利文献7），因此，GAT现在主要作为卵巢癌的复发监控来使用，基本不将其用作早期发现用的标志物。

专利文献2公开了以下测定法，即基于通常癌组织中以糖转移酶为代表的多种蛋白质的表达出现亢进或者降低的报告，尝试从妇科癌患者血中检测成为候补标志物的蛋白质，结果发现2种糖转移酶测定的有用性。但是，这种情况下，报告了这些糖转移酶的表达或合成产物，与其说是与妇科癌相关，倒不如说是与消化器官癌相关。之后，尽管确认在卵巢癌细胞株有表达（非专利文献8），但是并没有卵巢癌或者其它妇科癌与消化器官癌的表达量的比较研究的报告。