[发明专利]用于来自血小板的含有生长因子的组合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及在存在或不存在细胞血液组份(血小板、红细胞和白细胞)的情况下由血液复合物获得含有生长因子的组合物的方法。本发明还涉及通过所述方法获得的含有生长因子的组合物。

现有技术

由患者的血液获得的含有生长因子的血液复合物的制备在现有技术中是广泛已知的。已经证实所述的含有生长因子的血液复合物具有非常重要的生物学性质，尤其是当它触发和刺激组织再生、减轻某些类型的疾病和障碍中的疼痛以及用于其它多种用途时。

作为实例，专利申请WO0044314A1(其申请人与本发明的申请人之一相同)涉及由自体血浆制备凝胶的方法，所述凝胶富含生长因子并且是由患者自身血液获得的；所述方法在更近期的专利申请WO2010130851A2(其也是由本申请的申请人提交的)中被更新。这两种方法具有共同的步骤，例如离心患者的血液、分离富含血小板的血浆和向富含血小板的血浆中加入氯化钙，以便活化血浆(即，导致血浆血小板中含有的生长因子被释放)和凝固血浆，直至它获得凝胶样稠度。

另一个已知的实例在专利ES2221770B2中公开。该专利涉及制备富含生长因子并且具有非常有益的生物学性质的血液复合物的方法。在这种情况中，所述复合物是液体形式。特定地，该复合物是富含生长因子的血浆的上清液，其获自诱导所述富含生长因子的血浆凝固和随后收缩后出现的上清液液相。该专利还描述了所述上清液的多种用途，在其应用中最重要的是其作为用于治疗眼疾病和障碍的滴眼液的用途(这归因于其液体稠度)。

根据现有技术已知的方法制备的含有生长因子的血浆凝胶、上清液或概括而言任意自体血液复合物无论其预期使用的用途如何均呈现出在它们失去其生物学性质之前必须立即应用的缺点。这种必然性在血液复合物含有释放的生长因子时特别关键。因此，无法制备在室温下长期保存的血液复合物，推荐立即应用它们(在上清液的情况下，在其制备的8小时内应用)，以避免蛋白质和生长因子的降解和变性或者可能的产品细菌污染。

迄今为止对自体血液复合物的立即使用的需求不受限制，因为已经使用它们的应用(组织再生、细胞培养、紧急应用或者甚至是每周或每半个月应用等应用)与所述立即使用是相容的。然而，现在具有生长因子的自体血液复合物的新的潜在应用正在出现，其需要所述复合物的连续渗入或应用，其中两次剂量之间的间隔时间减少。如目前其已知的那样，自体血液复合物(凝胶、上清液等)在这些新应用中的使用需要由患者进行连续血液提取。显然，这种情况会对患者的生活质量和长期治疗慢性或变性疾病的可行性产生极为不利的影响。

存在大量能用含有生长因子的血液复合物治疗的慢性或变性疾病的实例，但是由于血液复合物必须立即使用并且不能贮存，所以没有：眼疾病、中枢神经系统疾病和变性关节疾病，以及概括而言所有那些需要长期或重复施用含有生长因子的血液复合物的疾病或障碍。

上面提及的疾病包括但不限于以下疾病：系统性红斑狼疮—一种影响结缔组织的慢性自身免疫性疾病，特征在于免疫系统产生炎症和组织损害，特别是由于抗体与器官细胞结合并形成抗原-抗体络合物导致的；舍格伦综合征—一种主要影响外分泌腺、从而导致干燥的系统性自身免疫性疾病；皮肌炎—一种导致肌肉和皮肤炎症的结缔组织疾病；类风湿性关节炎—一种系统性自身免疫性疾病，其引起慢性炎症、主要是关节的慢性炎症，从而进行性地导致具有不同程度的畸形和功能残疾的破坏。目前有研究表明，如果能被定期施用于患者，含有生长因子的自体血液组合物能最有效地减缓所有这些疾病。

本发明的一个目的是提供由富含血小板的血浆或富含血小板的血浆的上清液获得含有生长因子的组合物的方法，其中该方法使得获得了能长期贮存且能容易地被运输的组合物，以至于该组合物适合不用于立即使用，而是用于在任意给定的时间或者当认为必要时应用。因此，本发明的方法应使得能获得在慢性疾病的治疗方法中可定期使用、无需由患者持续进行血液提取、从而改善患者生活质量的组合物。

本发明的另一个目的是，由本发明的方法获得的组合物维持其生物学性质不受损。

本发明的另一个目的是，由本发明的方法获得的组合物维持改善的生物学性质，其特别适用于治疗自身免疫性疾病。

发明概述

本发明的一个目的是获得含有生长因子的组合物的方法，其包括几个步骤。