[发明专利]吉西他滨免疫测定

说明书

技术领域

本发明涉及用于确定人生物学样品中的吉西他滨的存在或定量人生物学样品中的吉西他滨的量以快速确定化疗期间最佳的药物浓度的免疫测定领域。

背景技术

癌症是用于描述一类都共享身体部位内的细胞开始失控地生长时所带来的共同特性的恶性肿瘤。大多数癌症形成为肿瘤，但也可能显现在通过它们所生长的组织的血液和循环中。癌症恶性肿瘤最通常通过手术、化疗和/或放疗的组合来治疗。用于治疗特定癌症的治疗类型取决于若干因素，包括癌症恶性肿瘤的类型和其诊断阶段。

吉西他滨是通常使用的细胞毒性剂，其用于治疗胰腺癌Poplin等人J Clin Oncol,27,23,3778-85,2009和非小细胞肺癌Zinner,RG等人，Int J Radiat Oncol Biol Phys,73,1,119-272009和Treat,JA等人,Ann Oncol,2009。吉西他滨还用作胰腺癌的辅助疗法(Saif,MW,JOP,10,4,373-72009；Li,J和MW Saif,JOP,10,4,361-52009)。虽然得到广泛使用，但该化合物一直伴有变得衰弱的副作用如骨髓抑制，并且伴有肝和肾损伤。通过监测体内的吉西他滨的水平并调整剂量，可以更好地控制并限制患者的这些副作用。

吉西他滨是下式的盐酸盐：

在吉西他滨的剂量与所得到的影响治疗效果的血清药物浓度之间存在高度变化的关系。这对女性和老年患者来说是特别重要的。这些组显示较低的清除率，对任何给定剂量产生较高的血浆浓度。吉西他滨(I)在体内由胞嘧啶核苷脱氨酶(CDA)代谢成其主要的药学上非活性代谢物：2',2'-二氟-2'-脱氧尿苷(dFdU)，其具有下式：

患者的血液、血浆或血清内至多仅存在痕量的其他吉西他滨代谢物。在准备用于免疫测定的诸如血液和血浆样品的人生物学样品时，必须使用四氢尿苷(THU)。该保存剂起到在收集患者样品期间抑制胞嘧啶核苷脱氨酶活性的作用以防止吉西他滨进一步代谢成式II化合物的非活性代谢物。保存剂四氢尿苷具有下式：

吉西他滨的个体内或个体间的药物代谢动力学差异度变化极大且受到许多因素的影响，包括：

○器官功能

○遗传调节

○疾病状态

○年龄

○取样时间，

○药物给药模式，以及

○与技术相关的给药。

由于此变化，不同个体内的相同剂量的相同药物可能产生显著不同的临床结果，如下面所阐释的(Hon,YY以及WE Evans，Clin Chem,44,2,388-4001998.)。相同吉西他滨剂量的功效基于个体药物代谢和患者内的最终药物浓度显著变化。治疗药物管理将使临床医师了解患者口腔和静脉内的药物浓度。通过治疗药物管理，药物剂量能够个性化给药至患者，并且有效治疗癌症且没有不期望的副作用的几率将会高得多(Nieto,Y,Curr Drug Metab,2,1,53-662001)。

此外，吉西他滨的治疗药物管理将作为极佳的工具来确保以实际处方剂量给药化疗和获得有效的血清浓度水平一致。据发现血清浓度的变化不仅是因为生理因素，还源于给药技术的变化(Caffo,O,S Fallani,E Marangon,S Nobili,MI Cassetta,V Murgia,F Sala,A Novelli,E Mini,M Zucchetti以及E Galligioni,Cancer Chemother Pharmacol,2010)。

吉西他滨的日常治疗药物管理需要获得可适于一般实验室设备的简单自动测试。最符合这些标准的测试是免疫测定，如放射性免疫测定和酶联免疫吸附测定。然而，这些免疫测定中使用的相应抗体必须证明对吉西他滨的宽交叉反应性，而对非药学上活性的吉西他滨代谢物和式III的保存剂没有任何明显活性。为了有效地监测吉西他滨的药物水平，抗体应该对活性化合物吉西他滨是最具有特异性的，并且对非药学上活性的代谢物2',2'-二氟-2'-脱氧尿苷(式II化合物)和保存剂四氢尿苷(式III化合物)显示出非常低的交叉反应性到没有交叉反应性。

发明内容