[发明专利]犬冠状病毒疫苗

说明书

技术领域

本发明描述了新的泛嗜性犬冠状病毒(CCoV)毒株的分离，以及包含CCoV毒株的新的免疫原性组合物的产生。尤其是通过序列分析在分子和生物学水平表征了该毒株。

背景技术

冠状病毒是在人类和鸟类中引起呼吸道和／或肠道疾病的大的有包膜单链RNA病毒(18)。在犬中，迄今已描述了三种冠状病毒。犬冠状病毒(CCoV)I型和II型是隶属于抗原组1的肠道病毒(13)，而最先由Erles等在英国报道(19)的犬呼吸道冠状病毒(CRCoV)是2组冠状病毒，其尤其是在与其他病原体结合时引起呼吸性窘迫(1，9)。

I型和II型CCoV广泛分布在欧洲(7，14)，通常是造成小犬中出现轻度至中度胃肠炎的原因，虽然死亡可以由于同时受两种基因型(5)或受其他病原体(3-11)感染而发生。单一CCoV感染通常限于胃肠道，导致出现食欲缺乏、腹泻和呕吐(Tennant等，1991)。

由于广泛分布的与CCoV相关的感染，存在对能够在犬中保护免受CCoV感染的疫苗的需要。

发明概述

本发明提供分离的不表达功能性辅助蛋白3c的泛嗜性犬冠状病毒(CCoV)。更具体而言，该CCoV毒株也不表达功能性辅助蛋白3b。在另一实施方案中，该分离的CCoV毒株包含分离的与SEQ ID NO：1或其互补链具有至少95％同源性的多核苷酸。在另一实施方案中，通过化学处理或加热来灭活该CCoV毒株。在另一实施方案中，该CCoV毒株是减毒的。在另一实施方案中，该分离的CCoV包含SEQ ID NO：5。

本发明还提供来自犬冠状病毒(CCoV)的分离的多核苷酸，其中该分离的多核苷酸与SEQ ID NO：1或其互补链具有至少95％同源性。更具体而言，该多核苷酸不编码功能性辅助蛋白3c。在另一实施方案中，该多核苷酸不编码功能性辅助蛋白3b。在另一实施方案中，该分离的多核苷酸由SEQ ID NO：1或其互补链组成。

本发明的另一实施方案提供来自CCoV的分离的多肽或由与SEQ ID NO：1具有至少95％同源性的多核苷酸编码的多种多肽。更具体而言，该多核苷酸不包含CB／05毒株多核苷酸。在另一实施方案中，该多肽与SEQ ID NO：2-10中任一个具有至少95％同源性。更具体而言，该多肽选自SEQ ID NO：4或5中的任一个。还更具体而言，该多肽是SEQ ID NO：5。

本发明的另一实施方案提供免疫原性组合物，其包含以下至少一种：(a)本文所述的多核苷酸、多肽或分离的犬冠状病毒(CCoV)；及可药用赋形剂、稀释剂、载体蛋白质或佐剂。在另一实施方案中，该免疫原性组合物包含该分离的犬冠状病毒(CCoV)的灭活或减毒形式。在另一实施方案中，该免疫原性组合物包含分离的来自CCoV的多肽或由与SEQ ID NO：1具有至少95％同源性的多核苷酸编码的多种多肽，其中该一种或多种多肽是该分离的CCoV的亚单位抗原。在另一实施方案中，该组合物不包含辅助蛋白3c。在另一实施方案中，该组合物不包含辅助蛋白3b。

本发明的另一实施方案提供上文所述的免疫原性组合物，用于在犬中治疗或预防冠状病毒感染。另一实施方案提供该免疫原性组合物在制备用于在犬中治疗或预防冠状病毒感染的药物中的用途。另一实施方案提供在犬中治疗或预防冠状病毒感染的方法，其包括以在犬中产生免疫原性反应的有效量施用该免疫原性组合物。

本发明的另一实施方案提供犬冠状病毒(CCoV)疫苗，其包含以下至少一种：(a)上文所述的多核苷酸；(b)上文所述的多肽；和／或(3)上文所述的分离的犬冠状病毒(CCoV)毒株。

本发明的这些及其他实施方案、特征和优势将从下文所示的发明详述和所附权利要求变得明显。

附图简述

附图说明本文所述新的CCoV毒株的系统发生关系。在系统发生水平，毒株450／07在S和M／N蛋白质序列中都与毒株CB／05聚类，尽管M／N序列中还显示最近检测到的与重组CCoV／TGEV毒株(CCoV-IIb)的严格相关性。

发明详述