[发明专利]萃取胜肽的方法及其在液相胜肽合成的应用

权利要求书

1.一种从由胜肽偶合反应所产生的反应混合物中萃取胜肽的方法，所述反应混合物含有所述胜肽及选自由N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺及N-甲基-2-吡咯啶酮组成的组的极性非质子性溶剂，其中所述方法包含步骤a）及步骤b）：

步骤a）包含向所述反应混合物中添加组分a1）及组分a2），其中：

组分a1）为2-甲基四氢呋喃；

组分a2）为水；

从而获得具有有机层及水层的两相系统；

步骤b）包含分离含有所述胜肽的所述有机层与所述水层，

其中：

步骤a）中所获得的所述两相系统的特征在于以下体积比：

极性非质子性溶剂:2-甲基四氢呋喃=1:20至1:2；及

极性非质子性溶剂:水=1:20至1:2。

2.如权利要求1项的方法，其中在步骤a）中，向所述反应混合物中添加另一组分a3），

组分a3）为有机溶剂1，所述有机溶剂1选自由正庚烷、甲苯、乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙腈及四氢呋喃组成的组；

从而获得具有有机层及水层的两相系统；

其中

步骤a）中所获得的所述两相系统的特征在于以下体积比：

极性非质子性溶剂:2-甲基四氢呋喃=1:20至1:2；

极性非质子性溶剂:有机溶剂1=1:5至30:1；及

极性非质子性溶剂:水=1:20至1:2。

3.如权利要求2所述的方法，其中步骤a）中所获得的所述两相系统的特征在于以下体积比：

极性非质子性溶剂:2-甲基四氢呋喃=1:6至1:3；

极性非质子性溶剂:有机溶剂1=1:1至4:1；及

极性非质子性溶剂:水=1:5至1:3。

4.如权利要求1至3中一项或多项所述的方法，其中所述极性非质子性溶剂选自由N,N-二甲基甲酰胺及N-甲基-2-吡咯啶酮组成的组。

5.如权利要求2至4中一项或多项所述的方法，其中所述有机溶剂1选自由乙腈及四氢呋喃组成的组。

6.如权利要求1至5中一项或多项所述的方法，其中所述组分a2）含有至少一种选自由氯化钠、硫酸氢钠、硫酸氢钾、碳酸氢钠及磷酸氢钠组成的组的无机盐。

7.如权利要求1至6中一项或多项所述的方法，其中所述组分a2）的pH值在5至8范围内。

8.如权利要求1至7中一项或多项所述的方法，其中在步骤b）之前对步骤a）中所获得的所述两相系统进行过滤。

9.如权利要求1至8中一项或多项所述的方法，其中在20℃至30℃的温度下进行步骤a）及步骤b）。

10.一种在液相中制备胜肽的方法，所述方法包含步骤aa）、步骤bb）及步骤cc）：

在步骤aa）中，在选自由N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺及N-甲基-2-吡咯啶酮组成的组的极性非质子性溶剂中且在存在偶合试剂的情况下进行胜肽偶合反应；

在步骤bb）中，根据权利要求1至10中一项或多项所述的方法萃取所产生的胜肽；及

在步骤cc）中，将步骤bb）中所获得的有机层的至少一部分蒸发。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述偶合试剂选自由O-1H-苯并三唑的脲盐、鏻盐及碳化二亚胺偶合试剂组成的组。

12.如权利要求10或11所述的方法，其中叔碱选自由N,N-二异丙基乙胺、三乙胺及N-甲基吗啉组成的组，且所述叔碱存在于步骤aa）的所述胜肽偶合反应中。

13.如权利要求10至12中一项或多项所述的方法，其另外包含进一步的步骤dd）、步骤ee）及步骤ff），其中

在步骤dd）中，将步骤cc）中所获得的所述有机层与选自由乙腈、乙醚、二异丙醚及甲苯组成的组的有机溶剂2组合；

在步骤ee）中，使至少很大一部分的所述胜肽沉淀；及

在步骤ff）中，通过过滤分离所述沉淀的胜肽。

14.如权利要求10至12中一项或多项所述的方法，其中在所述胜肽的N末端保护基为叔丁氧基羰基保护基的情况下，用三氟乙酸处理步骤cc）中所获得的所述有机层，所述叔丁氧基羰基保护基通过所述三氟乙酸处理来移除。