[发明专利]能够特异性识别转铁蛋白受体的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及与人TfR抗原进行特异性反应的抗TfR抗体。本发明还涉及包含抗TfR抗体的医药组合物、特别是与恶性肿瘤的治疗相关的医药组合物。

背景技术

癌症占日本死亡原因的第一位，随着着高龄化，患者的数量年年增加，强烈希望开发有效性和安全性高的药剂和治疗方法。目前的化学疗法、放射线疗法等，在杀死癌细胞的同时会对正常细胞造成损害，引起强烈的副作用。为了解决上述问题，将癌细胞中特异性表达的分子作为标的设计药剂来进行治疗的分子标的治疗的研究开始盛行。由于这种分子标的癌治疗药具有抗体药的半衰期长、副作用少等优点，因此受到很大的关注。作为开发的成功例，可以举出以CD20为标的的嵌合抗体利妥昔单抗（非专利文献1）、以Her2/neu为标的的人化抗体曲妥珠单抗（非专利文献2）、以血管内皮生长因子（VEGF）为标的的人化抗体贝伐单抗等。这些抗体以癌作为对象病患被使用，认可了其治疗效果。

作为治疗药的抗体的使用，分为非标记和标记抗体。非标记抗体的作用机理认为是：（1）涉及免疫系统细胞、分子的抗体依赖性细胞损伤活性（ADCC）（非专利文献3）或补体依赖性细胞损伤活性（CDC）（非专利文献4）、（2）标的分子引起的与细胞内生存或增殖相关的信号的阻碍、（3）细胞凋亡的诱导、（4）细胞因子的分泌调节等。通过各种机理的组合，使得肿瘤细胞死亡、停止增殖，从而发挥治疗效果。对于标记抗体而言，将抗体与放射线物质、毒素、酶或药剂等细胞损伤物质连接，利用抗体的特异性将这些物质送达至癌组织，从而实现治疗效果的提高和副作用的降低。

转铁蛋白受体（TfR）作为与转铁蛋白（Tf）结合的铁进入细胞内用的细胞膜结构，最初发现存在于网织红细胞上（非专利文献5）。后来知道在胎盘的滋养膜细胞（非专利文献10到12）、活化的淋巴细胞（非专利文献12）、各种肿瘤细胞等中表达。例如，报告了在乳腺癌（非专利文献6）、前列腺癌（非专利文献7）、肺癌（非专利文献8）、胰腺癌（非专利文献9）、大肠癌（非专利文献30、31）、胃癌（非专利文献31）、膀胱癌（非专利文献32、33）、肝癌（非专利文献34）、宫颈癌（非专利文献35）、脑肿瘤（非专利文献36）、慢性淋巴性白血病（非专利文献37、38）、非霍奇金淋巴瘤（非专利文献38、39）、成人T细胞白血病（非专利文献40）中，转铁蛋白受体高表达。此外，由于TfR在各种癌细胞表面高表达，而在正常细胞中的表达低，因此，很久以前就被认作是癌治疗的分子标的（非专利文献13到16、专利文献1、2）。但是，迄今为止所开发的抗人TfR抗体都是来自动物的抗体。通常，已知如果将人以外的动物的抗体，例如小鼠的抗体投给人，则会被识别为异物，因此在人体内诱导出针对小鼠抗体的人抗体（Human Anti Mouse Antibody：以下，记为HAMA）。已知HAMA与投与的小鼠抗体反应，引起副作用（非专利文献17到20），加速所投与的小鼠抗体从体内消失（非专利文献18、21和22），从而减弱小鼠抗体的治疗效果（非专利文献23和24）。用实际上存在的小鼠抗人TfR抗体进行临床一期试验，观察到HAMA的产生，未能发现显著的治疗效果（非专利文献25）。

为了回避这样的问题，开发了嵌合抗体（专利文献3和4）。嵌合抗体包括来自2个或其以上的种的抗体的一部分（小鼠抗体的可变区和人抗体的恒定区等）。这样的嵌合抗体的优点在于保持了小鼠抗体的特征，并且因具有人Fc而能够刺激人补体或细胞损伤活性。但是，这样的嵌合抗体依然会引起“人抗嵌合抗体”即HACA（Human Anti-Chimera Antibody）应答（非专利文献26）。进而，开发了只有取代的抗体的一部分为互补决定域（即“CDR”）的重组抗体（专利文献5和6）。使用CDR移植技术，产生由小鼠CDR、人可变区骨架和恒定区构成的抗体，即“人化抗体”（非专利文献27）。但是，这样的人化抗体对人也具有免疫原性，会引起HAHA（Human anti-Human Antibody）反应（非专利文献28、29）。因此，在临床应用中，期待更加安全有效的没有免疫原性的抗体治疗药。

但是，在抗体新药研发中，虽然获取识别存在于细胞膜表面的“完整状态的”标的癌抗原的抗体是必不可少的，但是由于标的癌抗原为膜蛋白，所以即使对于针对已知的癌抗原的抗体而言，其取得也是很困难的。为了消除这些问题点，本发明的发明人迄今为止制作了由1000亿个独立的克隆构成的巨大的人抗体文库，利用该数据库确立了针对癌细胞和组织的细胞膜表面存在的蛋白质（细胞表面抗原）的抗体的网罗式获取法（专利文献7～9）。

现有技术文献