[发明专利]使用腺相关病毒（AAV）载体递送蛋白

权利要求书

1.一种病毒载体，包括：

腺相关病毒（AAV）的5’末端反向重复序列（ITR）和3’AAV ITR；

启动子；

所述启动子下游的限制性酶切位点以允许编码一个或多个感兴趣的蛋白的多核苷酸的插入，和

所述限制性酶切位点下游的转录后调节元件，

其中所述启动子、所述限制性酶切位点和所述转录后调节元件位于所述5’AAV ITR的下游和所述3’AAV ITR的上游。

2.根据权利要求1所述的病毒载体，还包括插入在所述限制性酶切位点并与所述启动子可操作地连接的多核苷酸，其中所述多核苷酸包括感兴趣的蛋白的编码区。

3.根据权利要求2所述的病毒载体，其中所述多核苷酸包括所述感兴趣的蛋白的所述编码区的直接上游的信号肽序列。

4.根据权利要求3所述的病毒载体，其中所述信号肽选自以下组成的组：干扰素的信号肽、人生长激素的信号肽、红细胞生成素（EPO）的信号肽、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的信号肽、胰岛素的信号肽、和其任何组合。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的病毒载体，其中所述载体包括与Kozak共有序列具有至少约70%、至少约80%、至少约90%序列同一性或更多的序列同一性的核苷酸序列。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的病毒载体，其中所述感兴趣的蛋白选自以下组成的组：全长抗体、生长激素（GH）、胰岛素样生长因子（IGF）、G-CSF、红细胞生成素（EPO）、胰岛素、抗体Fab片段、抗体scFV片段、血友病相关的凝血蛋白、抗肌萎缩蛋白、溶酶体酸性脂肪酶、苯丙氨酸羟化酶（PAH）、糖原贮积病相关的酶、和其任何变体。

7.根据权利要求1-5中任一项所述的病毒载体，其中所述感兴趣的蛋白是病毒的中和抗体。

8.根据权利要求7所述的病毒载体，其中所述病毒的中和抗体是人类免疫缺陷病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）、或流感病毒的中和抗体。

9.根据权利要求8所述的病毒载体，其中所述HIV的中和抗体选自以下组成的组：b12抗-HIV抗体、2G12抗-HIV抗体、4E10抗-HIV抗体、2F5抗-HIV抗体、和其任何变体。

10.根据权利要求8所述的病毒载体，其中所述HCV的中和抗体选自以下组成的组：AR3A抗-HCV抗体、AR3B抗-HCV抗体、AR4A抗-HCV抗体、和其任何变体。

11.根据权利要求1-5中任一项所述的病毒载体，其中所述感兴趣的蛋白是疟疾的中和抗体。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的病毒载体，其中所述启动子包括巨细胞病毒（CMV）立即早期启动子、鸡β-肌动蛋白（CAG）启动子、泛素C（UBC）启动子、或其任何变体。

13.根据权利要求1-11中任一项所述的病毒载体，其中所述启动子包括剪接供体、剪接受体、或其任何变体。

14.根据权利要求13所述的病毒载体，其中所述剪接供体包括与SEQ ID NO:5具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。

15.根据权利要求13所述的病毒载体，其中所述剪接受体包括与SEQ ID NO:6具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。

16.根据权利要求1-11中任一项所述的病毒载体，其中所述启动子包括与SEQ ID NO:1具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。

17.根据权利要求1-11中任一项所述的病毒载体，其中所述启动子包括与SEQ ID NO:2-4中任一个具有至少90%序列同一性的核苷酸序列。

18.根据权利要求1-16中任一项所述的病毒载体，其中所述转录后调节元件是病毒转录后调节元件。

19.根据权利要求18所述的病毒载体，其中所述病毒转录后调节元件是土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件（WPRE）、乙型肝炎病毒转录后调节元件（HBVPRE）、RNA转运元件（RTE）、或其任何变体。

20.根据权利要求1-19中任一项所述的病毒载体，还包括所述转录后调节元件下游的转录终止区。