[发明专利]具有粘度改变表型的丝状真菌

权利要求书

1.一种衍自亲本株的丝状真菌变异株，所述变异株包含使所述变异株的细胞与所述亲本株的细胞相比产生改变量的功能性Gasl蛋白的遗传变更，其中所述变异株的细胞在深层培养有氧发酵过程中，(i)与所述亲本株的细胞相比，产生出需要改变的搅拌量来维持预选的溶氧量的细胞发酵液，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，产生出在预选的搅拌量下维持改变的溶氧量的细胞发酵液。

2.根据权利要求1所述的变异株，其中功能性Gasl蛋白的所述改变量为减少量，并且所述变异株在深层培养有氧发酵过程中，(i)与所述亲本株的细胞相比，产生出需要减少的搅拌量来维持预选的溶氧量的细胞发酵液，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，产生出在预选的搅拌量下维持增加的溶氧量的细胞发酵液。

3.根据权利要求1或2所述的变异株，其中所述遗传变更包含所述亲本株中存在的gasl基因的破坏。

4.根据权利要求3所述的变异株，其中破坏所述gasl基因是缺失所述gasl基因的全部或部分所致。

5.根据权利要求3所述的变异株，其中破坏所述gasl基因是缺失包含所述gasl基因的基因组DNA的一部分所致。

6.根据权利要求3所述的变异株，其中破坏所述gasl基因是诱变所述gasl基因所致。

7.根据权利要求3-6中任一项所述的变异株，其中破坏所述gasl基因是使用位点特异性重组进行。

8.根据权利要求3-7中任一项所述的变异株，其中破坏所述gasl基因是与在所述gasl基因的遗传基因座处引入可选择标记相结合进行。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的变异株，其中所述变异株不产生功能性Gasl蛋白。

10.根据权利要求1-8中任一项所述的变异株，其中所述变异株不产生Gasl蛋白。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的变异株，其中所述变异株还包含编码目的蛋白质的基因。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的变异株，还包含sfb3基因的破坏。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的变异株，还包含破坏至少一个选自sfb3基因、sebl基因、mpgl基因、crzl基因和tps2基因的基因。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的变异株，其中所述变异株每单位量生物质产生的蛋白质量与所述亲本株基本上相同或更多。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的变异株，其中所述丝状真菌是盘菌亚门(Pezizomycotina)物种。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的变异株，其中所述丝状真菌是木霉属(Trichoderma)物种。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的变异株，其中所述丝状真菌是里氏木霉(Trichoderma reesei)。

18.一种制备丝状真菌细胞的变异株的方法，包括：将遗传变更引入丝状真菌细胞的亲本株中，与所述亲本株的细胞相比所述遗传变更改变了功能性Gasl蛋白的产生，从而产生变异丝状真菌细胞，所述变异丝状真菌细胞在深层培养有氧发酵过程中，(i)与所述亲本株的细胞相比，产生出需要改变的搅拌量来维持预选的溶氧量的细胞发酵液，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，产生出在预选的搅拌量下维持改变的溶氧量的细胞发酵液。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述遗传变更减少或防止功能性Gasl蛋白的产生，从而产生变异丝状真菌细胞，所述变异丝状真菌细胞在深层培养有氧发酵过程中，(i)与所述亲本株的细胞相比，产生出需要减少的搅拌量来维持预选的溶氧量的细胞发酵液，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，产生出在预选的搅拌量下维持增加的溶氧量的细胞发酵液。

20.根据权利要求18或19所述的方法，其中所述遗传变更包括利用遗传操作破坏亲本丝状真菌细胞中的gasl基因。

21.根据权利要求18-20中任一项所述的方法，其中所述遗传变更包括利用遗传操作缺失亲本丝状真菌细胞中的gasl基因。