[发明专利]组合疫苗

说明书

本公开涉及预防或治疗人和动物体内葡萄球菌感染的、包含两种或更多种免疫原性葡萄球菌多肽的组合物和包含免疫原性葡萄球菌多肽的多价疫苗组合物。

疫苗可预防多种传染性疾病。因此，许多现代疫苗由病原体的预防性抗原制得，这些抗原通过分子克隆分离并纯化。这些疫苗被称为“亚单位疫苗”。亚单位疫苗的开发已经成为最近几年中大量研究的焦点。新的病原体的出现和抗生素抗性的发展已经产生了开发新的疫苗及鉴别用于开发亚单位疫苗的其他候选分子的需求。同样，基因组和蛋白质组研究中发现的新的疫苗抗原使得能够开发新的亚单位疫苗候选者，尤其是针对细菌的病原体。然而，尽管亚单位疫苗倾向于消除灭活或减毒病原体疫苗的副作用，它们的“纯”态意味着亚单位疫苗不总是具有充足的免疫原性以给予防护。

一种提高疫苗组合物效力的方法为提供包含显性抗原的多价疫苗，该显性抗原能引发B细胞和T细胞应答从而在接受疫苗的个体内发起更强烈的免疫应答。典型的多价疫苗可以是包含多种抗原分子的全细胞疫苗。例如，卡介苗(“BGG”)包含能在人体内引发预防性免疫的减毒牛结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)菌株。对于许多病原体，化学灭活或热灭活虽然可以产生给予预防性免疫的疫苗免疫原，其也产生诸如发烧和注射部位反应的副作用。就细菌而言，灭活的生物体倾向于具有如此的毒性，使得其副作用限制了这类天然的疫苗免疫原的应用，因此使得疫苗开发滞后于药物开发。而且，使用全细胞灭活生物体的有效的疫苗开发遇到表位掩蔽、免疫显性、低抗原浓度和抗原过剩的问题。

目前还没有预防或治疗金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)感染的有效的疫苗接种方法。金黄色葡萄球菌为一种细菌，其在约20-40%的正常健康人群中的一般栖所为鼻子的上皮层，并且其还常见于人的皮肤上，一般不产生危害。然而，在某些情形下，尤其是当皮肤受到损伤时，该病原体可以引起感染。在患者可能接受手术治疗和/或服用免疫抑制药物的医院，这是一个突出的问题。由于他们已接受的治疗，这些患者更易于受到金黄色葡萄球菌感染。由于抗生素在控制微生物感染中的广泛使用，金黄色葡萄球菌的耐抗生素菌株已经出现。耐甲氧西林的菌株已普遍存在，且这些耐性菌株中的许多还耐几种其他的抗生素。

因此，金黄色葡萄球菌是能引起许多种疾病的主要的人病原体，其中的一些疾病为可危害生命的疾病，包括败血症、心内膜炎、关节炎和中毒性休克。这种能力由生物体的多样性及其参与毒力的组分库决定。在感染的开始阶段及随着感染的进行，生物体的需求和环境会发生变化，且这可以通过金黄色葡萄球菌产生的毒性决定因子的相应变化反映。在感染开始时，病原体附着到宿主组织上并因此产生大量的细胞表面相关的附着蛋白，这一点非常重要。病原体还具有通过产生这样的因子而逃避宿主防御的能力，该因子减少吞噬作用或干扰细胞被循环抗体识别的能力。

因此，越来越需要鉴别具有预防性并可用于多价疫苗中的葡萄球菌抗原。这种组合可以与诸如多聚糖抗原的非蛋白的免疫原性分子和抗菌剂组合使用，以提供用于控制葡萄球菌感染的治疗策略。也在本公开范围内的是，改良治疗方案以便用作为包含多种抗原的单一疫苗给药的备选方案的一系列短暂分开的给药来免疫个体。

因此，本公开涉及组合或多价免疫原性组合物和疫苗，以及它们在预防和治疗葡萄球菌感染中的用途。我们公开了这样的多肽，其单独具有预防性且通常为包含胞外结构域的跨膜蛋白并为葡萄球菌细胞生长所必需。例如，divIB为包含胞内结构域、跨膜结构域和胞外结构域的整膜蛋白。divIB及其片段，提供了对动物模型中至少一种金黄色葡萄球菌感染的预防。相关的基因divIC也是一种整膜蛋白，其胞外结构域可引发对葡萄球菌感染的预防性免疫。本公开还涉及由基因PheP、YdiE和FtsL编码的抗原，所述抗原的每一种都具有胞外结构域。

根据本发明的一方面，提供了包含选自以下的两种或更多种不同多肽的免疫原性组合物，其中所述多肽由不同的葡萄球菌基因编码：

i)多肽或其免疫原性片段，其包含SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列组成；

ii)多肽或其免疫原性片段，其包含SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列组成；

iii)多肽或其免疫原性片段，其包含SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:22所示的氨基酸序列组成；

iv)多肽或其免疫原性片段，其包含SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列或由SEQ ID NO:23所示的氨基酸序列组成；