[发明专利]具有纤维二糖水解酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸有效
申请号: | 201280015133.5 | 申请日: | 2012-01-26 |
公开(公告)号: | CN103620028B | 公开(公告)日: | 2017-05-03 |
发明(设计)人: | M.A.斯特林格;B.麦克布雷尔 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司;诺维信股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所11105 | 代理人: | 史悦 |
地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 纤维 糖水 活性 多肽 编码 多核苷酸 | ||
1.具有纤维二糖水解酶活性的分离的多肽,其中所述多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少99%序列同一性,且所述多肽是Talaromyces byssochlamydoides多肽。
2.具有纤维二糖水解酶活性的分离的多肽,其由SEQ ID NO:2的氨基酸20-456的序列组成。
3.一种组合物,其包含权利要求1或2的多肽。
4.一种分离的多核苷酸,其编码权利要求1或2的多肽。
5.一种核酸构建体或表达载体,其包含权利要求4的多核苷酸,所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个调控序列,所述调控序列指导所述多肽在表达宿主中的产生。
6.一种重组宿主细胞,其包含权利要求4的多核苷酸,所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个调控序列,所述调控序列指导多肽的产生,其中所述重组宿主细胞不是植物细胞。
7.一种产生权利要求1或2的多肽的方法,其包括:(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养细胞,所述细胞以其野生型形式产生所述多肽;和(b)回收所述多肽。
8.一种产生具有纤维二糖水解酶活性的多肽的方法,其包括:(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求6的宿主细胞;和(b)回收所述多肽。
9.一种产生具有纤维二糖水解酶活性的多肽的方法,其包括:(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养用编码权利要求1或2所述多肽的多核苷酸转化的转基因植物或植物细胞;和(b)回收所述多肽。
10.一种产生亲本细胞的突变体的方法,所述方法包括灭活编码权利要求1或2的多肽的多核苷酸,其导致突变体不产生所述多肽。
11.由权利要求10的方法产生的突变细胞,其中所述突变细胞不是植物细胞。
12.权利要求11的突变细胞,其进一步包含编码原生(native)或异源蛋白的基因。
13.一种产生蛋白的方法,其包括:(a)在有助于所述蛋白产生的条件下培养权利要求11或12的突变细胞;和(b)回收所述蛋白。
14.一种降解或转化纤维素材料的方法,其包括:在权利要求1或2的具有纤维二糖水解酶活性的多肽存在下用酶组合物处理所述纤维素材料。
15.权利要求14的方法,其中所述纤维素材料经过预处理。
16.权利要求14或15的方法,其中所述酶组合物包含一种或多种选自下组的酶:纤维素酶、具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、半纤维素酶、酯酶、木质素分解酶、果胶酶、过氧化物酶和蛋白酶。
17.权利要求16的方法,其中所述木质素分解酶是漆酶。
18.权利要求16的方法,其中所述纤维素酶是一种或多种选自下组的酶:内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡糖苷酶。
19.权利要求16的方法,其中所述半纤维素酶是一种或多种选自下组的酶:木聚糖酶、乙酰木聚糖酯酶、阿魏酸酯酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、木糖苷酶和葡糖醛酸糖苷酶。
20.权利要求16-19中任一项的方法,其中所述酶组合物进一步包含棒曲霉素和/或膨胀素。
21.权利要求14-20中任一项的方法,进一步包括回收经降解的纤维素材料。
22.权利要求21的方法,其中经降解的纤维素材料是糖。
23.权利要求22的方法,其中所述糖选自下组:葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖,和阿拉伯糖。
24.一种产生发酵产物的方法,其包括:(a)在权利要求1或2的具有纤维二糖水解酶活性的多肽存在下,用酶组合物糖化纤维素材料;(b)用一种或多种发酵微生物发酵经糖化的纤维素材料以产生发酵产物;和(c)从发酵回收发酵产物。
25.权利要求24的方法,其中所述纤维素材料经预处理。
26.权利要求24或25的方法,其中所述酶组合物包含一种或多种选自下组的酶:纤维素酶、具有纤维素分解增强活性的GH61多肽、半纤维素酶、酯酶、木质素分解酶、果胶酶、过氧化物酶和蛋白酶。
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