[发明专利]纤维素酶组合物和使用相同组合物用于改善木质纤维素生物质转化成可发酵糖的方法在审
| 申请号: | 201280013801.0 | 申请日: | 2012-03-16 |
| 公开(公告)号: | CN103492561A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
| 发明(设计)人: | T·卡佩尔;I·尼古拉耶夫;S·兰茨;M·K·福达拉;M·Y·席 | 申请(专利权)人: | 丹尼斯科美国公司 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12P19/14;C12N15/80;D06M16/00 |
| 代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 张莉;黄革生 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 纤维素酶 组合 使用 相同 用于 改善 木质 纤维素 生物 转化 发酵 方法 | ||
1.一种分离的多肽,其包含:
a)与SEQ ID NO:135具有至少约70%同一性的氨基酸序列;或者
b)N末端序列和C末端序列,其中所述N末端序列包含衍生自第一β-葡糖苷酶的第一氨基酸序列,长度为至少200个残基,并且包含SEQ ID NOs:164-169的一种或多种或全部,并且其中所述C末端序列包含衍生自第二β-葡糖苷酶的第二氨基酸序列,长度为至少50个残基,并且包含SEQ ID NO:170,
其中所述多肽具有β-葡糖苷酶活性。
2.根据权利要求1所述的分离的多肽,其包含与SEQ ID NO:135具有至少约80%同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的分离的多肽,其包含与SEQ ID NO:135具有至少约90%同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的分离的多肽,其包含衍生自第一β-葡糖苷酶的N末端序列和衍生自第二β-葡糖苷酶的C末端序列,其中所述第一β-葡糖苷酶和所述第二β-葡糖苷酶彼此不同。
5.根据权利要求1或4所述的分离的多肽,其中所述N末端序列和所述C末端序列并不直接连接,而是通过接头结构域功能性地连接。
6.根据权利要求5所述的分离的多肽,其中所述N末端序列、所述C末端序列或所述接头结构域包含长度为3、4、5、6、7、8、9、10或11个氨基酸残基的环区序列,所述环区序列包含SEQ ID NO:171或172的氨基酸序列。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的分离的多肽,其与第一β-葡糖苷酶或第二β-葡糖苷酶相比具有改善的稳定性。
8.根据权利要求7所述的分离的多肽,其中所述改善的稳定性是在储存条件或生产条件下增加的蛋白水解切割抵抗性。
9.根据权利要求4-8中任一项所述的分离的多肽,其中所述N末端序列包含与SEQ ID NO:54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78或79的等长度序列具有至少90%序列同一性的氨基酸序列,其中所述C末端序列包含SEQ ID NO:170的序列基序。
10.根据权利要求4-8中任一项所述的分离的多肽,其中所述N末端序列包含SEQ ID NOs:164-169的序列基序的一种或多种或全部,并且所述C末端序列包含与SEQ ID NO:54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78或79的等长度序列具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
11.根据权利要求9或10所述的分离的多肽,其中所述N末端序列接在SEQ ID NOs:136-148的序列基序中的3种或更多种、4种或更多种、5种或更多种之后,并且其中所述C末端序列接在SEQ ID NOs:149-156的序列基序中的2种或更多种、3种或更多种、4种或更多种之后。
12.一种组合物,其包含根据权利要求1-11中任一项所述的分离的多肽。
13.根据权利要求12所述的组合物,其还包含一种或多种纤维素酶。
14.根据权利要求13所述的组合物,其中所述一种或多种纤维素酶选自内切葡聚糖酶、GH61/内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和其他β-葡糖苷酶。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的组合物,其中所述组合物还包含一种或多种半纤维素酶。
16.根据权利要求15所述的组合物,其中所述一种或多种半纤维素酶选自木聚糖酶、β-木糖苷酶或L-α-阿拉伯呋喃糖苷酶。
17.根据权利要求12-16中任一项所述的组合物,其中所述β-葡糖苷酶以相对于所述组合物中蛋白质的总量的1重量%至75重量%的量存在。
18.根据权利要求12-17中任一项所述的组合物,其为培养物混合物或发酵液。
19.根据权利要求18所述的组合物,其为全发酵液制剂。
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