[发明专利]具有唾液酸糖链的糖肽的制造方法、用于该制造方法的唾液酸糖链加成氨基酸衍生物及该糖肽

权利要求书

1.具有唾液酸糖链的糖肽的制造方法，其特征为，所述方法包含以下步骤，

(1)将具有羟基的树脂(resin)与氨基氮以Boc基保护的氨基酸进行结合的步骤；

其中，所述结合步骤为，将所述树脂的羟基与所述氨基酸的羧基通过酯化反应进行结合的步骤，

(2)通过使所述Boc基脱离而形成游离氨基的步骤；

(3)将以下的(i)及(ii)的步骤至少重复进行1次：

(i)通过进一步结合以Boc基保护氨基氮的其他氨基酸，使结合于树脂的氨基酸延长的步骤；

其中，所述延长步骤为，将所述其他氨基酸的羧基与结合于所述树脂的氨基酸的所述游离氨基结合的步骤，

(ii)通过使(i)中的所述Boc基脱离而形成游离氨基的步骤；以及

(4)以酸切断树脂的步骤；

其中，步骤(1)中的所述氨基酸和/或步骤(3)的至少1次的(i)中的所述其他氨基酸为糖链加成氨基酸，且该糖链加成氨基酸的糖链非还原末端中的至少1个具有唾液酸，且该唾液酸的羧基是由苯甲酰甲基保护。

2.如权利要求1所述的制造方法，其中，所述糖链加成氨基酸为天冬酰胺结合型糖链或黏蛋白结合型糖链。

3.如权利要求1或2所述的制造方法，其中，所述步骤(4)中，所述酸为三氟乙酸/三氟甲烷磺酸/二甲基硫化物/间甲酚的混合酸。

4.如权利要求1至3中任一项所述的制造方法，其中，所述步骤(1)中的所述氨基酸和/或所述步骤(3)的至少1次的(i)中的所述其他氨基酸为对碱不稳定的非天然氨基酸。

5.如权利要求1至4中任一项所述的制造方法，其中，所述糖链加成氨基酸中的至少1个为唾液酸糖链天冬酰胺，所述唾液酸糖链天冬酰胺具有6个以上的糖残基。

6.如权利要求1至4中任一项所述的制造方法，其中，所述糖链加成氨基酸中的至少1个为唾液酸糖链天冬酰胺，所述唾液酸糖链天冬酰胺具有9～11个糖残基。

7.如权利要求1至4中任一项所述的制造方法，其中，所述糖链加成氨基酸中的至少1个为唾液酸糖链天冬酰胺，所述糖链天冬酰胺具有6个以上的糖残基，并结合有2分支型糖链。

8.如权利要求1至4中任一项所述的制造方法，其中，所述糖链加成氨基酸由下式(1)所示；

式中，R³及R⁴中的一方为下式(2)，另一方为选自由氢原子及下式(2)～(6)所示基团组成的组中的基团：

9.如权利要求1至8中任一项所述的制造方法，其中，在所述步骤(1)之前，还包括将硫醇化合物与树脂结合的步骤。

10.如权利要求9所述的制造方法，其中，在所述步骤(4)之后，还包括(5)将具有唾液酸糖链的糖肽的硫酯体与肽片段或糖肽片段连接的步骤。

11.如权利要求1至10中任一项所述的制造方法，其中，在所述前述步骤(4)的以所述酸切断所述树脂之前，还包括使标识剂反应的步骤。

12.如权利要求11所述的制造方法，其中，所述标识剂为丹磺酰卤化物。

13.如权利要求1至10中任一项所述的制造方法，其中，所述步骤(1)～(3)中的至少1个步骤中，在进行所述氨基酸的缩合反应和/或Boc基的脱离反应时，照射微波。

14.如权利要求1至13中任一项所述的具有唾液酸糖链的糖肽的制造方法，其特征为，在所述步骤(4)之后，还包括将保护所述唾液酸的羧基的苯甲酰甲基脱保护的步骤。

15.具有唾液酸糖链的糖肽，由权利要求1至14中任一项所述的制造方法所制造。