[发明专利]具有纤维素水解增强活性的多肽及其编码多核苷酸有效
| 申请号: | 201280010414.1 | 申请日: | 2012-02-23 |
| 公开(公告)号: | CN103384678B | 公开(公告)日: | 2017-01-18 |
| 发明(设计)人: | 张羽;段俊欣;汤岚;吴文平 | 申请(专利权)人: | 诺维信股份有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/37 | 分类号: | C07K14/37;C12N15/56;C12N15/63;C12P19/00;A01H1/00 |
| 代理公司: | 北京坤瑞律师事务所11494 | 代理人: | 史悦 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 纤维素 水解 增强 活性 多肽 及其 编码 多核苷酸 | ||
1.一种具有纤维素分解增强活性的分离的多肽,其选自下组:
(a)多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少70%序列同一性,或与SEQ ID NO:4的成熟多肽具有至少60%序列同一性,或与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少70%序列同一性;
(b)多肽,其由这样的多核苷酸编码,所述多核苷酸在至少中等严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列,(ii)包含于SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列中的cDNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;
(c)多肽,其由这样的多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少70%序列同一性,或与SEQ ID NO:3的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列同一性,或与SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少70%序列同一性;
(d)SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6的成熟多肽的包含一个或多个(例如几个)氨基酸的取代、缺失和/或插入的变体;和
(e)(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的具有纤维素分解增强活性的片段。
2.权利要求1的多肽,其包含或组成为SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6的氨基酸序列或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6的成熟多肽;或其具有纤维素分解增强活性的片段。
3.权利要求1的多肽,其由下述质粒中包含的多核苷酸所编码:大肠杆菌CGMCC4601中所含的质粒pGH61_664,大肠杆菌CGMCC4602中所含的质粒pGH61_1590,或大肠杆菌CGMCC4600中所含的质粒pGH61_4950。
4.一种分离的多核苷酸,其编码权利要求1-3任一项的多肽。
5.一种产生权利要求1-3中任一项的多肽的方法,其包括:
(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养细胞,所述细胞以其野生型形式产生所述多肽;和
(b)回收所述多肽。
6.一种产生具有纤维素分解增强活性的多肽的方法,其包括:
(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养重组宿主细胞,所述重组宿主细胞包含权利要求4的多核苷酸;和
(b)回收所述多肽。
7.一种产生亲本细胞的突变体的方法,其包括破坏或缺失编码权利要求1-3任一项的多肽的多核苷酸或其部分,导致突变体与亲本细胞相比产生较少的所述多肽。
8.一种产生权利要求1-3任一项的多肽的方法,其包括:
(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养转基因植物或植物细胞,所述植物或植物细胞包含编码所述多肽的多核苷酸;和
(b)回收所述多肽。
9.用编码权利要求1-3任一项的多肽的多核苷酸转化的转基因植物、植物部分或植物细胞。
10.一种双链抑制RNA(dsRNA)分子,其包含权利要求4的多核苷酸的亚序列,其中该dsRNA任选地为siRNA或miRNA分子。
11.一种抑制具有纤维素分解增强活性的多肽在细胞中表达的方法,其包括对细胞施用或者在细胞中表达权利要求10的双链抑制RNA(dsRNA)分子。
12.一种分离的多核苷酸,其编码信号肽,所述信号肽包含或组成为SEQ ID NO:2的氨基酸1至22,SEQ ID NO:4的氨基酸1至21,或SEQ ID NO:6的氨基酸1至22。
13.一种产生蛋白的方法,其包括:
(a)在有助于所述蛋白产生的条件下培养重组宿主细胞,所述宿主细胞包含与权利要求12的多核苷酸可操作地连接的编码所述蛋白的基因,其中所述基因对于所述多核苷酸是外源的;和
(b)回收所述蛋白。
14.一种组合物,其包含权利要求1-3任一项的多肽。
15.权利要求14的组合物,其为纤维素分解酶组合物或去污剂组合物。
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