[发明专利]粒子处理

说明书

技术领域

本发明涉及实验室技术，其中磁性粒子被用来从液体介质中分离物质。本发明尤其涉及粒子从其被收集到的磁探针的释放。本发明尤其可用于分离生物材料。

背景技术

磁性粒子可用于从液体介质分离特定的物质。此类粒子涂有与该物质相互作用的特定的试剂，或者该物质固有地附接到粒子的表面。粒子与附接到粒子的物质一起从液体分离。这按照传统是通过除去液体完成的。目前还使用磁分离探针。此类探针包括可在细长的覆盖罩内上下移动的磁体。粒子被收集在罩的表面上，该罩将磁体保持在其下方位置处。探针接着被转移到另一液体，并且将磁体移动至其上方位置，从而释放粒子。这样的方法已在例如US6040192和US6447729中有所描述。

浓度比(即，初始体积与最终体积的比率)优选地被最大化，以便可以尽可能有效地进一步处理所收集的粒子。初始体积常常相对较大(例如，>1000μl)，并且要收集的物质的浓度可以非常低。收集到的粒子可通过利用液体粘附释放到非常小的液体体积中，从而用润湿已经收集粒子的表面的少量液体冲洗掉粒子。通过适当的探针和器皿设计，可以实现非常小的释放体积(例如，5–10μl)。此类方法已在例如US6207463、US6448092和US6596162中有所描述。

WO99/40444、US2006269385和WO2009076560描述了其中在接纳器皿下方附加地使用磁体以便有利于将粒子从探针释放到液体中的方法。

发明内容

现在实施根据权利要求的发明。

根据本发明，在置于板的表面以下的磁体的帮助下将磁性粒子从板上的探针释放。板的表面为干燥的，或者在板表面上具有液体膜或液滴。

根据本发明，可以实现非常高的浓度比。

板可以是例如显微镜载片、生长基质或容器的底部。

附图说明

附图形成与本发明的一些示例性实施例有关的书面描述的一部分。

图1示出分离方法的步骤；以及

图2示出该方法的修改。

具体实施方式

在该方法中使用的磁性粒子的尺寸通常为0.5–10μm，典型地为1–5μm。各种各样的此类粒子可商购获得。粒子涂有用于待分离的物质的亲和试剂，或者表面固有地与该物质相互作用。例如，二氧化硅表面可在没有特定涂层的情况下与核酸相互作用。样本通常为生物样本，并且待分离的物质可以例如由细胞(例如，细菌或癌细胞)、蛋白质(例如，抗原或抗体)、酶或核酸组成。

从其中收集粒子的样本的体积通常为20–1000μl，但有时也使用实质上更大或更小的体积。

用来收集粒子的探针包括具有封闭的下端的中空罩和可在其内部上下移动的磁体。当粒子被收集时，磁体保持在其下方位置，从而使粒子附接到罩的下端。当粒子被释放时，磁体被提升至其上方位置，在该位置，磁体不再保持附接到罩上的粒子。然而，粒子仍然趋于通过与粒子一起转移的少量液体的粘附力保持在罩上。

磁体优选地为永磁体。磁体优选地为长的，以使得粒子作为被集中的斑点或环附接在罩的端部上。最优选地，磁体如此长，使得磁体的上极保持在液体表面以上，参见例如US6207463和US6448092。当从大量的液体体积中(例如多达50ml)收集粒子时，可优选的是首先将粒子集中在器皿的侧壁或底部上，参见例如US6020211。当从非常少量的液体体积中(例如5–10μl)收集粒子时，可优选的是使用在底部上具有小凹部的器皿，参见例如US6596162。

粒子在板的表面上的释放位置从罩被释放。粒子被借助于置于释放位置下方的释放磁体从罩向板吸引。在罩的表面上，存在与粒子一起的液体薄膜。这有助于从罩除去粒子。

释放磁体可以是竖直放置的磁体，优选棒状磁体或磁棒。当探针磁体也是竖直的，磁体的相反极优选地抵靠彼此放置，以使得探针朝释放位置自动且正确地定向。如果希望这样，则将探针放在板上时，罩中的磁体必须仍然保持在足够低的位置。当在释放板上存在多个释放位置时，可以在每个释放位置以下存在释放磁体。备选地，可存在单个或一组磁体，并且板或磁体在释放步骤中被移除，以便在需要时使磁体处于释放位置下方。

也可以某种方式标记释放位置，以便有利于正确地放置探针。当板足够透明时，释放位置可被板下方的光源包围。也可通过印刷等方式标记释放位置。