[发明专利]用于生产尸胺的方法和重组微生物有效

申请号：	201280009948.2	申请日：	2012-02-20
公开（公告）号：	CN103492553B	公开（公告）日：	2018-06-12
发明（设计）人：	C·维特曼;S·坎德	申请（专利权）人：	巴斯夫欧洲公司
主分类号：	C12N1/21	分类号：	C12N1/21;C12P13/00;C12N15/31;C12R1/15
代理公司：	北京市中咨律师事务所 11247	代理人：	黄革生;林柏楠
地址：	德国路***	国省代码：	德国;DE
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摘要：
搜索关键词：	尸胺重组微生物乙酰失调微生物赖氨酸脱羧酶重组DNA分子输出多肽生产细胞
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【权利要求书】：

1.包含失调的尸胺输出体活性的微生物，其中失调的尸胺输出体活性至少部分是由于尸胺输出体多肽的失调，所述尸胺输出体多肽由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成，其中所述微生物是棒杆菌属并且所述失调的尸胺输出体活性是增强的尸胺输出体活性，并且所述微生物具有失调的N-乙酰尸胺形成活性。

2.包含失调的尸胺输出体活性的微生物，其中失调的尸胺输出体活性至少部分是由于尸胺输出体多肽的失调，所述尸胺输出体多肽由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成，其中所述微生物是谷氨酸棒杆菌并且所述失调的尸胺输出体活性是减少的尸胺输出体活性。

3.如权利要求1中要求保护的微生物，其中赖氨酸脱羧酶活性增强。

4.如权利要求3中要求保护的微生物，其中赖氨酸脱羧酶活性是由于一种或多种赖氨酸脱羧酶多肽的表达，所述多肽由SEQ ID NO:3或4的氨基酸序列组成。

5.如权利要求1中要求保护的微生物，所述微生物具有至少一种失调的基因，所述基因选自由天冬氨酸激酶、天冬氨酸半醛脱氢酶、二氢吡啶二羧酸合酶、二氢吡啶二羧酸还原酶、四氢吡啶二羧酸琥珀酰酶、琥珀酰-氨基-酮基庚二酸转氨酶、琥珀酰-二氨基-庚二酸脱琥珀酰酶、二氨基庚二酸表异构酶、二氨基庚二酸脱氢酶、精氨酰-tRNA合成酶、二氨基庚二酸脱羧酶、丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、转酮醇酶、转醛醇酶、6-磷酸葡糖酸内酯酶、果糖1,6-二磷酸酶、高丝氨酸脱氢酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、琥珀酰辅酶A合成酶、甲基丙二酰辅酶A变位酶、二胺乙酰基转移酶的基因组成的组。

6.如权利要求5中要求保护的微生物，所述微生物具有增强的赖氨酸输入活性。

7.如权利要求6要求保护的微生物，其中增强的赖氨酸输入活性是由于降低的赖氨酸输出体活性或增强的赖氨酸通透酶活性或增强的赖氨酸/尸胺逆向转运体活性或其任意组合。

8.如权利要求6要求保护的微生物，其中增强的赖氨酸输入活性是由于至少一种赖氨酸输出体多肽的降低的活性，所述多肽由SEQ ID NO:5的氨基酸序列组成。

9.如权利要求6中要求保护的微生物，其中增强的赖氨酸输入活性是由于增强的赖氨酸通透酶活性或由于增强的赖氨酸/尸胺逆向转运体活性或二者的组合。

10.如权利要求4要求保护的微生物，其中微生物没有或具有降低的N-乙酰尸胺形成活性。

11.如权利要求2要求保护的微生物，其中微生物具有增强的N-乙酰尸胺形成活性和降低的尸胺输出体活性。

12.如权利要求10中要求保护的微生物，其中通过失调N-乙酰尸胺形成多肽的活性失调N-乙酰尸胺形成活性，所述N-乙酰尸胺形成多肽由SEQ ID NO:13的氨基酸序列组成。

13.如权利要求1中要求保护的微生物，其中微生物属于真细菌进化枝。

14.如权利要求11中要求保护的微生物，其中微生物是谷氨酸棒杆菌。

15.如权利要求12中要求保护的微生物，其中微生物是谷氨酸棒杆菌。

16.生产尸胺的方法，所述方法包括发酵如权利要求1中要求保护的微生物。

17.生产尸胺的方法，所述方法包括发酵如权利要求5中要求保护的微生物。