[发明专利]淀粉样蛋白低聚物结合核酸适体

说明书

技术领域

本发明涉及淀粉样蛋白低聚物结合核酸适体及其应用。

背景技术

α-突触核蛋白(α-Syn)是在帕金森氏病(PD)或路易氏体失智症(DLB)中所观察到的包涵体的主结构蛋白，据认为，其通过聚集而得到细胞毒性、引起疾病。据报告，作为α-Syn聚集中间体的α-突触核蛋白低聚物显示出了比最终形成的淀粉样纤维更高的细胞损伤性，因而暗示出α-突触核蛋白低聚物可能为PD、DLB发症中的毒性主体。

此外，并不限于α-突触核蛋白，阿兹海默氏病、感染性蛋白质病、多聚谷氨酰胺病、亨廷顿舞蹈症等的发病还分别与β淀粉样肽和Tau蛋白、感染性蛋白、多聚谷氨酰胺肽、亨廷顿蛋白等淀粉样蛋白的累积有很大相关。另外，这些淀粉样蛋白也是在体内以可溶化形态持续存在的蛋白质，在受到某些刺激时构型发生变化而形成低聚物，其后变成不溶化形态的淀粉样纤维。

在以这些淀粉样蛋白的沉积等为原因的疾病中，对淀粉样蛋白低聚物的特异性检测在疾病原因的探究查明中是必要的。此外，只要能够把握低聚物在组织内的局部存在，则在预防及诊断中也是有效的。

因此开发出了用于特异性检测低聚物形态的淀粉样蛋白的各种技术。例如，在日本特表2010-531992号公报和日本特表2010-530227中公开了抗淀粉样β肽的抗体。此外，在日本特表2010-502938号公报和日本特表2010-537962号公报中公开了抗淀粉样β蛋白的单克隆抗体。

另一方面，已知有作为与任意分子特异结合的多核苷酸分子的核酸适体。核酸适体可使用市售的核酸合成机化学全合成，与特异抗体相比，成本非常低，并且易于修饰，因而具有可设计结构变化的优点。进一步地，与肽不同，即使在高温发生变性，也会恢复原状，因而稳定性优异。核酸适体形成特定的三维结构，对目标分子发挥出选择性的分子识别功能。作为核酸适体的三维结构，迄今为止据报告其可采取发夹型、假结型、凸环型、G-四分体型之类的各种形态。

作为用于检测α-突触核蛋白的核酸适体，已知具有2个以上发夹型结构的核酸适体M5-15(参照Biotechnol.Lett.,(2010)vol.32,pp.643-648)。据记载，该与α-突触核蛋白结合的核酸适体M5-15不仅可识别低聚体型的突触核蛋白，还可识别单体型的α-突触核蛋白。

发明内容

发明所要解决的课题

如上所述，需要特异性识别淀粉样蛋白低聚物，但尚未得到对于特异性识别淀粉样蛋白低聚物有用的核酸适体。

因而，本发明的目的在于提供能够特异性识别淀粉样蛋白低聚物的核酸适体和使用其的淀粉样蛋白低聚物的检测方法。

解决课题的手段

本发明提供下述方式。

[1]一种对淀粉样蛋白低聚物具有结合性的核酸适体，该核酸适体具有G-四分体结构、且为选自由下述多核苷酸组成的组中的至少1种：

(1)由序列编号1～序列编号18的任意之一所表示的碱基序列构成的多核苷酸；

(2)由至少含有4组至少2个连续的鸟苷核苷酸、且是序列编号1～序列编号18的任意之一所表示的碱基序列中有1个或2个以上碱基发生缺失、取代或者添加而成的碱基序列所构成的多核苷酸；以及

(3)多核苷酸，其是含有所述(1)或(2)的多核苷酸作为结构单元的多聚体。

[2]如[1]所述的核酸适体，其中，所述(3)的多核苷酸具有所述(1)或(2)的多核苷酸与将各(1)或(2)的多核苷酸间连接的接头序列。

[3]一种淀粉样蛋白低聚物检测试剂盒，其含有[1]或[2]所述的核酸适体。

[4]一种淀粉样蛋白低聚物的检测方法，该方法包括以下步骤：使[1]或[2]所述的核酸适体与待检试样接触；以及对所述待检试样中的淀粉样蛋白低聚物和所述核酸适体的复合物进行检测。

[5]如[4]所述的淀粉样蛋白低聚物检测方法，其中，所述待检试样为选自由髓液、血清、血浆和它们的稀释物组成的组中的至少1种。

[6]一种多核苷酸，其由序列编号1～序列编号18的任意之一所表示的碱基序列构成。

[7]一种多聚体多核苷酸，其是含有由序列编号1～序列编号18的任意之一所表示的碱基序列构成的多核苷酸作为结构单元的多聚体。

发明的效果

根据本发明，能够提供可特异性识别淀粉样蛋白低聚物的核酸适体和使用该核酸适体的淀粉样蛋白低聚物的检测方法。

附图说明