[发明专利]通过对流增强输送法(CED)向脑部输送选择性复制的单纯疱疹病毒载体

说明书

技术领域

本发明涉及用于治疗神经胶质瘤的组合物和化合物。

背景技术

恶性神经胶质瘤是最常见的原发性脑部肿瘤，并且与非常差的预后有关(Wrensch等，2002)。据推测，神经胶质瘤源自于内源性神经胶质祖细胞或神经干细胞(Canoll和Goldman，2008)，它们与所述内源性神经胶质祖细胞或神经干细胞都具有沿着白质纤维束(whiter matter tract)和血管周围空间和软膜下空间转移的能力(Louis，2006)。因此，恶性神经胶质瘤是高度浸润性肿瘤，通过手术将它们予以完全切除是不可行的。观察到80%的恶性神经胶质瘤在2cm至3cm的初始肿瘤块内复发，由此使在充分治疗浸润性肿瘤细胞处的常规治疗方式的局限性受到高度关注(Hess等，1194)。

单纯疱疹病毒(HSV-1)是一种大型天然嗜神经双链DNA病毒，该病毒正在被积极开发成有用的复制选择性(溶瘤)和复制缺陷型基因治疗载体(Bowers等，2003)。到目前为止，两个复制选择性病毒构建体已经达到了恶性神经胶质瘤患者的临床试验阶段(Rampling等,2000;Markert等,2000;Papanastassiou等,2002;Harrow等,2004)。这些病毒被命名为G207和HSV1716，它们在γι34.5基因的两个拷贝中都具有无效突变。这个基因的产物在增强HSV-1感染神经元并克服宿主细胞对病毒感染的反应的能力中是关键的(He等，1997)。此外，γι34.5基因的无效突变赋予这些载体在肿瘤细胞中选择性复制的能力(Shah等，2003)。

迄今为止，在选择性复制的HSV-1的所有临床试验中，载体施用已经得以通过直接肿瘤内或脑实质内注射来实现。早期的临床试验涉及将载体直接注射入MRI增强肿瘤块中的直接注射(Rampling等,2000；Markert等,2000；Papanastassiou等,2002)。这些研究证明恶性神经胶质瘤患者中HSV1716的体内复制的安全性并提供了有限的证据。然而，显著的载体分布和治疗效果的确凿证据尚未得到展示。虽然这可能涉及到临床证实载体复制的方法学困难，但是存在与肿瘤内注射的有效性有关的显著不确定性(Dempsey等，2006)。

根据定义，Ⅳ级神经胶质瘤由组织坏死面积来表征(World Health Organisation(世界卫生组织)，2007年)。结果，利用能够在活的恶性神经胶质瘤细胞内复制的复制选择性病毒载体对坏死的原发性肿瘤块的直接接种不太可能有效地治疗原发性肿瘤块，或者更重要的是，不太可能有效地治疗浸润性肿瘤细胞。另外，原发性肿瘤块往往适合进行手术切除，使得肿瘤内注射复制选择性载体变得不必要。事实上，Harrow等(2004)对在经历恶性神经胶质瘤复发或者新诊断出的恶性神经胶质瘤的切除术的患者中的HSV1716外周肿瘤注射进行了1/II期研究。该研究证明了这种方法是安全的，尽管对于这种方法而言有效性显然是关键的，但是必须对病毒的分布进行优化以利于尽可能多的浸润性肿瘤细胞的转导。

对流增强输送法(convection enhanced delivery,CED)涉及使用细导管和受精确控制的输注速度以利用整体流(bulk-flow)使治疗剂直接分布到脑部细胞外空间中，这可能沿着与神经胶质瘤细胞能够转移相同的胞外路径进行。与依赖于输注来实现充分的药物分布的药物输送技术(如卡莫司汀浸渍可生物降解性聚合物)不同，采用CED可以将药物均匀地分布在脑部的大的体积上，而不管治疗剂的分子尺寸如何(Morrison等，1994)。因此，这是一个将病毒载体介导的基因治疗应用于患有恶性神经胶质瘤的患者的脑部的理想技术。

HSV-1载体的直径为120nm至300nm(Jacobs等，1999)，而平均而言，脑部细胞外空间的直径为38nm至64nm(Thorne和Nicholson，2006)。显然，这有可能使通过CED施用基于HSV-1的载体无法实现。因此，在这项研究中，已经检查了通过CED将复制选择性HSV-1病毒构建体分布在灰质和白质中所进行的分布，并且也评价了增强病毒载体分布的各种策略。