[发明专利]评估再生软骨的方法

说明书

技术领域

本发明涉及评估再生软骨的方法。

背景技术

对于颅颜面的先天型态形成异常，或切除恶性肿瘤后的颅颜面缺损，至今是采用以自体组织移植的组织修复以及再建。然而，自体组织移植目前仍残存着可采组织面积的限制，以及对采取部位造成侵袭性等课题。其中软骨再生医疗，相对地在临床应用持续进步，目前，世界普及的方法是使用自体软骨细胞的移植术(ACI(autologous chondrocyte implantation))。ACI原法是于1995年首先由瑞典的研究团队发表报告。ACI原法是对于因运动外伤等造成的关节软骨的局部缺损，将自体培养软骨细胞制成细胞悬浊液投予至缺损部，进而为防止外漏而披覆骨膜贴片(patch)的方法。

有关颅颜面范围的缺损以及异常，目前报告有使用硅胶植入物(silicone implant)的隆鼻术再生手术例，或对马鞍鼻(saddle nose)等注入自体软骨细胞的悬浊液的应用例。

有关评估经培养的软骨细胞特性，至今已利用例如基因表现以及表面标记(surface marker)。然而，现状是该等方法缺乏定量性，且最终必须牺牲一部分欲获得的细胞群。

该等技术的相关技术是例如下术文献所记载的技术。

布里特伯格M、林达尔A、尼尔森A、欧尔森C、伊萨克森O、彼得森L，1994，以自体软骨细胞移植进行膝盖的重度软骨缺损的治疗，新英格兰医学杂志)331(14)：889-895(Brittberg M，Lindahl A，Nilsson A，Ohlsson C，Isaksson O，Peterson L.1994.Treatment of deep cartilage defect in the knee with autologous chondrocytes transplantation.N Engl J Med331(14)：889-895).

矢永H、矢永K、今井K、古贺M、副岛C、大森K，2006，用于颅颜或鼻腔的增殖与修复的经培养的自体人类耳廓软骨细胞与自体血清的临床应用，整形和改造外科117(6)：2019-2030(Yanaga H，Yanaga K，Imai K，Koga M，Soejima C，Ohmori K.2006.Clinical application of cultured autologous human auricular chondrocytes with autologous serum for craniofacial or nasal augmentation and repair.Plast Reconstr Surg117(6)：2019-2030).

发明内容

[发明欲解决的课题]

本发明的目的是提供一种无需牺牲再生软骨或成为其材料的软骨细胞的一部分，且定量地评估再生软骨的方法。

[解决课题的手段]

根据本发明的一个实施方式，可提供一种评估再生软骨的方法，其是包含将含有耳廓软骨细胞的细胞群于培养基存在下进行放置，其后，自所述培养基中采取至少一部分的液体成分，及测定采取的所述液体成分中所含的GFAP含量，以及根据所述GFAP含量来判断自所述细胞群获得或可得的再生软骨是否适合移植。

附图说明

图1是表示各种细胞中GFAP基因的表现量图。

图2是表示来源相异的人类耳廓软骨细胞中GFAP基因的表现量图。

图3是表示使用经培养的人类耳廓软骨细胞，评估由人类耳廓软骨细胞所产生的GAG与GFAP的相关性的结果图。

图4是表示使用经培养的人类耳廓软骨细胞，评估由人类耳廓软骨细胞所产生的COL2与GFAP的相关性的结果图。

图5是表示使用藉由培养人类耳廓软骨细胞可得的培养上清液，评估由人类耳廓软骨细胞所产生的GAG与GFAP的相关性的结果图。

图6是表示使用藉由培养人类耳廓软骨细胞可得的培养上清液，评估由经培养的人类耳廓软骨细胞所产生的COL2与GFAP的相关性的结果图。

图7是表示分别培养软骨细胞及纤维母细胞后所得的培养上清液中GFAP量的测定结果图。

图8是移植以图7所示的经培养的软骨细胞#1后的再生组织的示意图。

图9是移植以图7所示的经培养的软骨细胞#2后的再生组织的示意图。

图10是移植以图7所示的经培养的软骨细胞#3后的再生组织的示意图。