[发明专利]微生物菌体的运输方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种方法，其在将具有腈水合酶活性的微生物菌体填充至密闭容器中运输时，通过使密闭容器内部的气相部分占总容积的20%以下，由此在使腈水合酶活性保持稳定的状态下进行运输。

背景技术

微生物产生的酶作为化学转化反应的催化剂而用于多种场合。尤其是，通过利用具有腈基的水合或水解能力的腈水合酶、腈水解酶等，能够廉价地制造化学工业上重要的酰胺、羧酸、α-羟基羧酸等。进一步，通过利用具有光学特异性水合或光学特异性水解能力的上述酶，制造作为医药、农药的重要制造原料的光学活性羧酸、氨基酸、α-羟基羧酸等也变得可能。

将微生物酶作为催化剂的化学转化反应中，需要将培养以及收集的微生物菌体的酶的活性稳定地维持至使用时为止。即，必须维持酶的活性，以避免由于保管或者运输时杂菌混入、腐败、或者溶菌导致微生物酶的催化能力丧失或者降低。此处，通常通过在稳定剂、代谢抑制剂、高浓度盐类的存在下进行保存，抑制微生物菌体保存时的微生物酶的失活、腐败和溶菌，从而应用于化学转化反应。不添加上述稳定剂等的情况下，边通过冻结、冷藏或者通气搅拌维持酶的活性边进行保管或者运输。

专利文献1（日本特开2004-305066号公报）中公开有通过添加腈类、酰胺类、羧酸类等稳定剂的微生物菌体的保存方法；专利文献2（日本特开2005-295815号公报）中公开有通过添加叠氮化合物等代谢抑制剂的微生物菌体的保存方法；专利文献3（日本特开2001-149065号公报）中公开有通过将微生物菌体的培养液成分添加至悬浮液中的微生物菌体的保存方法。另外，专利文献4（日本专利第3163224号）中公开有通过添加高浓度无机盐类的保存方法。进一步，对于通过冷冻而进行保存的方法，已知有专利文献5（日本特开2003-219870号公报），对于通过通气搅拌而进行保存的方法，已知有专利文献6（日本特开2003-144144号公报）。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2004-305066号公报

专利文献2：日本特开2005-295815号公报

专利文献3：日本特开2001-149065号公报

专利文献4：日本专利第3163224号

专利文献5：日本特开2003-219870号公报

专利文献6：日本特开2003-144144号公报

发明内容

发明要解决的问题

到目前为止已知的保存方法中，使用稳定剂等添加剂的方法由于在后面的工序中需要将添加剂等进行分离，因此有对制品的品质产生影响的担心，且制造方法变得麻烦。以将菌体冷冻的方法保存的微生物菌体的悬浮液存在冷冻、融解操作麻烦等处理性的问题，另外有伴随着该操作酶活性丧失或者降低的担心。另外，从防止杂菌的増殖和菌体细胞的稳定化的观点出发，优选冷藏下保存，但需要保持低温的设备、电力，因此在冷却成本方面的负担重。将微生物菌体保存在高浓度无机盐类水溶液中的方法，需要在使用时将菌体充分地洗涤，存在添加的无机盐类、废水处理花费成本的缺点。也报告有通过通气搅拌等使微生物菌体的酶活性被维持在一定程度，然而根据酶的不同，该效果并不相同，此外通气和搅拌还需要动力，在成本方面的负担也重。因此，在现有技术的基础上，期望进一步稳定地保存具有腈水合酶活性的菌体的方法。

用于解决问题的方案

本发明人等对于将由培养、收集而得到的微生物菌体的悬浮液廉价并且稳定地运输的条件进行深入了研究，结果发现，通过将运输中使用的容器内部的气相设为20%以下，能够稳定地将具有腈水合酶活性的菌体保存和运输，至此完成本发明。

即，本发明为在能够密闭的容器内保存具有腈水合酶活性的微生物菌体的方法，其特征在于，使填充有包含前述微生物菌体的悬浮液的前述容器内的气相部分占容器内部总容积的2%以上且20%以下。

另外，本发明为一种使用能够密闭的容器运输具有腈水合酶活性的微生物菌体的方法，其特征在于，使填充有包含前述微生物菌体的悬浮液的前述容器内的气相部分占容器内部总容积的2%以上且20%以下。

本发明的方法中，优选将所述容器内的气相部分的比例设为5%以上且20%以下。另外，前述保存或运输的温度为例如冰点～35℃的温度。进一步，所述菌体悬浮液的分散介质为有机酸水溶液，作为有机酸可列举出例如丙烯酸。