[实用新型]细胞培养装置

说明书

技术领域

本发明一般地涉及生物学及医学领域。特别地，本发明涉及细胞培养，尤其是多种细胞的共培养。 

背景技术

细胞培养是生物学及医学领域的重要技术，其目的是使细胞在体外条件下进行生长和增殖。 

应用最为广泛的细胞培养形式是在培养容器中合适的培养基中对一种细胞进行培养，例如单层培养。这种培养的缺点是无法准确地模拟细胞在体内的真实环境。例如，这种培养无法实现不同细胞种类之间的通信，而这在体内环境中对细胞的性状有重要的影响。 

为了使得体外细胞培养环境尽可能接近体内真实环境，人们开发了多细胞共培养技术。在共培养技术中，将两种或更多种细胞置于同一培养环境中（例如同一培养基中）。 

细胞共培养主要分为直接共培养和非直接共培养。直接共培养是指将不同细胞直接接种在同一培养容器中，使得不同的细胞彼此直接接触。直接共培养的缺点是难以清楚地观察不同种细胞的生长，并且难以分离特定的目的细胞用于后续研究。非直接共培养是将不同细胞培养在不同的载体上，再将所述载体置于同一培养环境中。非直接培养系统的实例有康宁（Corning）公司的Transwell共培养系统以及Millipore公司的Millicell悬挂式小室等。这些系统的缺点是只能进行非直接共培养，不能实现两种贴壁细胞的直接共培养。另外一种共培养方法是采用条件培养基进行培养，这种方法试剂和人力消耗较大，操作繁琐。 

发明内容

本发明提供一种细胞培养装置或细胞共培养装置，其包含可通透薄 层，所述薄层具有供细胞在其上贴附并生长的上表面和下表面。所述上表面和下表面可分别接种和培养不同的细胞。本发明的细胞培养装置能够实现细胞-细胞近程相互作用，从而模拟两种不同贴壁细胞的直接共培养。本发明的细胞培养装置能够同时实现两种、三种、四种或更多种不同细胞的共培养。本发明的细胞培养装置能够同时实现不同细胞的直接和间接共培养，从而更为准确地模拟体内细胞生长环境。本发明的装置还允许在共培养过程中容易地分离特定目的细胞。此外，本发明细胞培养装置的设计灵活性较大，可以按需要将多个本发明装置平行放于同一个培养容器中或者竖直叠放在一起。所述多个本发明装置可以各自为不同尺寸，也可以各自接种不同种细胞。这样，目的细胞被放置于类似于体内的三维微环境中，更能促进其生长并且模拟在体内的行为。 

本发明还提供了细胞培养方法，其包括在可通透薄层的两个表面上分别接种和培养不同的细胞。 

本发明还提供了测试细胞-细胞近程相互作用的方法，其包括在可通透薄层的两个表面（上表面和下表面）分别接种和培养不同的细胞，然后对所述细胞的性状或参数进行评价。 

本发明细胞培养方法的一般步骤如下： 

（1）单种细胞培养：将制备好的细胞悬液加入到细胞培养孔中，待培养基渗入到膜表面后，通过所述的培养基更换通道加入新鲜的培养基； 

（2）不同种细胞之间的直接共培养的方法：先将本发明的细胞培养装置倒置以使底面朝上，将一种或更多种贴壁细胞接种在下部细胞培养孔中，待细胞贴壁后，将装置翻转，在膜的上表面接种一种或多种细胞，从而上下两层的细胞之间直接共培养，但与此同时可以方便的收集上层的目的细胞； 

（3）不同种细胞间的非直接共培养的方法：在培养皿中预先接种一种或多种贴壁细胞，待其铺满整个培养皿底部，将方法（1）中已接种好的细胞培养装置放入这个培养皿中，即可实现不同种细胞间的非直接共培养。 

与本领域常规的非直接共培养相比，本发明细胞培养装置下部细胞培养孔中的细胞能够通过近程相互作用更有效地对上部细胞培养孔中的细胞产生影响。因此，本发明的细胞培养装置特别适用于难以培养的细胞，或用于对单个细胞进行培养，例如用于干细胞、受精卵、胚胎的培养以及 用于克隆技术中。 

附图说明

以下附图构成本说明书的一部分，其用于进一步展示本发明的某些方面。通过参考这些附图中的一幅或更多幅并与本文所述具体实施方案相结合，可以更好地理解本发明。在这些附图中，相同的附图标记代表相同的组件。 

图1是本发明细胞培养装置的一个实施方案的示意图。其中，图1a为主视图，图1b为侧视图，图1c为俯视图，图1d为剖视图，图1e为轴测图。其中附图标记如下：1－可通透薄层；2－下基板；3－上基板；4－上部细胞培养孔；5－凹陷；6－夹持部；7－培养基更换通道。 

图2是本发明细胞培养装置一个实施方案的示意图，其中5为凹陷，8为凹陷5相对于的凸起。 

图3是本发明细胞培养装置中细胞培养孔的照片。 

图4a-4c显示将本发明细胞培养装置与不同细胞培养容器的组合应用。