[实用新型]一种电镜超薄切片一次性染色套装

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种电镜超薄切片一次性染色套装，属于生物电子显微科学领域。

背景技术

在生物电子显微科学领域中，超薄切片是一种经典方法，电子染色是其中的关键技术之一。传统的超薄切片电子染色，其染液采用醋酸双氧铀和柠檬酸铅，染色方法是：在蜡板上滴一滴铀染液，使超薄切片载网的样品面向下悬浮在染液滴上，20分钟后用镊子夹持载网，在盛满双蒸水的烧杯中上下反复冲洗30次（或流水冲洗2-3分钟），将载网放置在干净滤纸上，稍干燥后再进行铅染，其操作方法同铀染。醋酸双氧铀具有放射性和化学毒性，柠檬酸铅不仅有化学毒性，而且极易与空气中的二氧化碳结合产生碳酸铅沉淀污染超薄切片。这种常规染色方法效率低，滴染过程暴露在空气中容易污染切片，水冲洗过程容易使切片脱落，染色工作完成后清洗器皿的过程，容易造成环境污染，初学者不好掌握。

针对常规染色技术容易出现的问题，国内外很多实验室和专业厂商不断推出各种创新或改良方法。最有代表性的是德国Leica徕卡公司的EM AC20型全自动载网染色机，在整个染色过程中，载网样品处于充满染色剂的密封无空气的染色室中，废液自动分类收集，同时染20个载网样品，但由于售价很高（几十万元），国内少有实验室购置使用。

近几年美国和日本等国家生产出了几种小型染色套装【2010-2012年度，北京中镜科仪产品目录P42】，它们在减少载网样品污染、经济实用等方面有一定改进，但仍存在一些问题。如：①硅胶狭缝固着载网染色套装系列，不能全封闭；②染色模具套装系列，用染液剂量较大；③金属薄片载网架套装系列，既可以全密闭染色又能节省试剂，但固着载网的方式欠可靠；④各类市售小型染色套装均为进口，价格仍较高（数百元至上千元）；⑤使用这些进口染色套装染色完毕，仍要清洗器皿以备再用，环境污染则不可避免。

发明内容

针对上述现有技术，本实用新型提供了一种电镜超薄切片一次性染色套装，用于超薄切片染色。本实用新型吸纳了同类产品的优点，弥补了不足，使染色过程更方便、安全、可靠，节省染色剂，价格比同类进口小型染色套装降低几十倍，实现了染色套装国产化。

本实用新型是通过以下技术方案实现的：

一种电镜超薄切片一次性染色套装，包括载网架和染色盒，其中，载网架由载网架主体和载网架盖构成，载网架主体连接在载网架盖一侧，载网架盖另一侧设有至少两个注液孔，载网架主体上设有两排载网孔，载网孔内周边设有载网孔凹槽，两排载网孔之间设有中央凹槽，每个载网孔外侧设有移网凹槽；载网架主体伸入染色盒内，染色盒底端设有液体排出口，使用时，液体排出口与市售输液器紧密连接，输液器出口插入废液瓶。

优选的，所述载网架盖一侧设有三个注液孔，注液孔的孔径尺寸适于普通医用注射器1号针头。在注入柠檬酸铅染液后，随即用空针管抽气后用封口膜封闭，尽可能减少空气与染液接触，避免切片上高电子密度沉积物。

优选的，所述载网架主体上设有两排载网孔，每排10个，载网孔内周边设有载网孔凹槽，载网孔凹槽深度为0.2mm，与载网厚度一致，载网孔外径3.1mm，便于置入载网和粘胶，内径2.5mm，与载网有效内径一致，内外孔半径之差为0.3mm。

优选的，所述移网凹槽的深度为0.2mm。

优选的，所述中央凹槽的宽度为5mm，深度为0.2mm，与载网孔凹槽和移网凹槽一致，以使置入后的载网与粘网胶在一个平面上。载网与粘胶接触宽度为0.3mm，从设计上不仅能控制每个载网粘胶量一致，而且极微量，使粘胶带来的污染可以忽略。考虑到国内有报道在中低倍率下可采用双面胶带固着载网【贺子义,胡冰,史永红.提高电镜超薄切片染色效率的自制装置〔J〕.电子显微学报,2011,30（1）:72-74】，据此设计中央凹槽的宽度为5mm，与国内市售双面胶带最小宽度相同，便于贴胶带，同时使胶带与载网接触宽度均为0.3mm。

所述染色盒由透明医用塑料制作，在插入载网架后可以看到载网孔和载网，注入液体后液面可视。使用时，注入0.5ml液体液面覆盖第二列载网，注入1ml液体液面覆盖第五列载网，注入1.5ml液体液面覆盖第八列载网，注入2ml液体液面覆盖第十列载网。根据末位载网对应的ml数值，估算并抽取适量液体。

所述染色盒底端的液体排出口口径采用与普通输液器相同的结构尺寸，便于接入输液器（带有液体流量调节器）。