[实用新型]磷光二氧化硅纳米颗粒标记的定量检测西马特罗的免疫层析试纸条

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种免疫层析试纸，特别是涉及一种用磷光二氧化硅纳米颗粒为标记的用于定量检测西马特罗的免疫层析试纸条。 

背景技术

西马特罗（cimaterol，CIM）又名喜马特罗，塞曼特罗，属于苯乙胺类药物的一种，是一种强效β2-受体激动剂。CIM在医学和兽医临床上主要用于扩张气管和增加肺通气量，可以用于哮喘、阻塞性肺炎、平滑肌痉挛和休克等症。研究显示，饲喂CIM可以增加肥育猪的饲料报酬并增加瘦肉率，对牛、鸡、鸭和绵羊等动物都有一定作用，故CIM常被作为饲料添加剂非法用于动物源性食品生产中。长期使用则可能造成CIM在可食动物组织内蓄积性残留，常常引起食用者发生心悸、肌肉震颤、疼痛、神经症状、头晕头痛、恶心呕吐、发热寒战等临床症状，特别对心脏病、糖尿病和高血压等病人危害更大。鉴于CIM的明显危害，我国禁止CIM在畜禽生产中应用，并规定在所有的动物可食组织中不得检出。 

目前，用于西马特罗残留检测的方法较多，如（1）理化分析方法，如高压液相色谱法、气相色谱法、薄层层析法、电泳法等；（2）免疫分析法，如放射免疫法、酶联免疫吸附法等；（3）生物测定法，如微生物学测定法、放射受体测定法等。这些方法需要昂贵的仪器设备，需要熟练的专业人员操作，过程复杂，时间较长，限制了其应用范围，难以在生产中推广应用。 

免疫分析标记技术是指以抗原抗体间的特异性反应为基础，通过标记物对某种物质进行定性或定量检测的研究。标记免疫分析一般是将酶、荧光素、放射性核素等标记物对抗体或抗原进行标记，这种标记物保持了抗体或抗原的活性，不影响标记物的活性，当它与相应抗体或抗原反应后，可以直接测定复合物中的标记物，直接对目标物质进行定量分析。通过标记物的信号放大作用，可以提高免疫分析的敏感性。 

荧光免疫分析是以荧光素、荧光染料、量子点、镧系元素等为标记物，将抗原或抗体标记以荧光物质与相应的抗原或抗体结合，在荧光显微镜下检测荧光强度的一种检测方法。该法具有灵敏度高、特异性强的特点，但某些荧光素会产生生物学毒性，导致抗原或抗体的灵敏度和选择性下降。 

实用新型内容

本实用新型要解决的技术问题：提供一种用磷光二氧化硅纳米颗粒为标记的检测西马特罗免疫层析试纸条，该试纸条具有特异、灵敏、快速、简便定量检测微量西马特罗的特点。 

本实用新型的技术方案： 

一种磷光二氧化硅纳米颗粒标记的检测西马特罗的免疫层析试纸条，底层为支撑层，中间层为吸附层，保护层固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为吸附纤维层、磷光抗体纤维层、纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，在纤维素膜层上设有用偶联西马特罗的载体蛋白溶液印制的隐形检测印迹，还设有用羊抗小鼠IgG、兔抗小鼠IgG或羊抗兔IgG抗体溶液印制的隐形对照印迹；所述磷光抗体纤维层采用吸附磷光抗体的玻璃纤维棉制成，磷光抗体采用磷光二氧化硅纳米颗粒标记的西马特罗抗体。 

所述磷光二氧化硅纳米颗粒的粒径为100-220nm。 

所述吸附纤维层用玻璃纤维棉、尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜；吸水材料层用吸水滤纸，支撑层用不吸水的韧性材料；纤维素膜层用硝酸纤维素膜、纯纤维素膜或羧化纤维素膜；偶联西马特罗的载体蛋白为牛血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。 

所述隐形检测印迹和隐形对照印迹为平行排列的“︱︱”直线式印迹，或“十十”字型排列印迹，或 “┬ ┬”字型排列印迹，或“┴ ┴”字型排列印迹，或“├├”字型排列印迹，或“┤┤”字型排列印迹。 

所述保护层为吸附纤维层、磷光抗体纤维层及吸水材料层上覆盖的保护膜；在吸附纤维层与磷光抗体纤维层交界处对应的保护膜上印制有样品标记线，该样品标记线偏向吸附纤维层一侧0.3-0.7cm。 

本实用新型的试纸条具有以下优点：

（1）特异性强，灵敏度高。本实用新型试纸条将高灵敏的磷光二氧化硅纳米颗粒与免疫层析技术相结合，磷光二氧化硅纳米颗粒无需包裹任何荧光材料便可自行发光，且磷光寿命长，制作成本低、光稳定性强，能获得比普通磷光检测更高的灵敏度。该试纸条既保持了传统胶体金试纸条简便快速的优点，又克服了后者灵敏度低、无法定量的缺点，检测灵敏度更高、更稳定，最低可检测到匹克级的痕量残留。

（2）简便、快速。该试纸条可对全血、尿液、唾液、组织匀浆等直接检测，无须进行样品的预处理，在紫外光下直接观测结果，也可借助荧光阅读器直接读值，实现定量检测。检测时只需将试纸条插入被检样品10～20秒，5分钟内即可判定检测结果，可现场操作，省时省力，操作简便，一步完成。