[实用新型]一种检测血清结缔组织生长因子用试剂盒

说明书

技术领域

    本实用新型涉及一种用于肝纤维化实验室检测的试剂盒，特别涉及一种检测血清结缔组织生长因子用试剂盒。

背景技术

目前，在肝纤维化的实验室诊断方面，多以检测细胞外间质(extracellulatrix，ECM)及其代谢产物作为辅助诊断指标。目前，临床较为常用的实验项目有：Ⅲ型前胶原(Procollagen Ⅲ，PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ，CⅣ)、层粘蛋白(Laminin，LN)和透明质酸(Hyaluronicacid，HA)。但在临床上，由于多种原因使得这些实验项目其诊断肝纤维化灵敏度与特异性均不够理想。因此，对于肝纤维化的实验室诊断寻找新的指标仍是临床上亟待解决的问题。

肝纤维化的辅助诊断的另外一些重要实验室指标，如细胞因子类项目可在大多数肝纤维化患者发生显著变化，但是目前临床实际应用的并不普遍。所以，仍需探索在诊断肝纤维化方面特异性好、灵敏度高且操作方便的方法。

发明内容：

为了探索现有技术存在的诊断肝纤维化的特异性不好、灵敏度不高的缺点，本实用新型公开了一种检测血清结缔组织生长因子用试剂盒，具有较好的特异性和灵敏度，操作简便。

本实用新型的技术方案为：一种检测血清结缔组织生长因子用试剂盒，所述试剂盒由盒体和盒盖组成，盒体内分隔为试剂区和设备区，在试剂区设有9个试剂储液单元，分别为CTGF标准品储液单元、1:100生物素标记的CTGF抗体储液单元、1:100链霉亲和素-辣根过氧化物酶储液单元、标准品和标本用稀释液储液单元、生物素化抗体稀释液储液单元、酶结合物稀释液储液单元、浓缩洗涤液储液单元、TMB显色剂储液单元、终止剂储液单元，在设备区设有封口膜、若干包被板条和一个包被板条支架。

所述的包被板条活动设于包被板条支架上。

所述的包被板条为矩形板，板上设有12个盛液孔。

所述的CTGF标准品储液单元的容积为0.5ml、所述的1:100生物素标记的CTGF抗体储液单元的容积为150μl、所述的1:100链霉亲和素-辣根过氧化物酶储液单元的容积为150μl、所述的标准品和标本用稀释液储液单元的容积为16ml、所述的生物素化抗体稀释液储液单元的容积为16ml、所述的酶结合物稀释液储液单元的容积为16ml、所述的浓缩洗涤液储液单元的容积为20ml、所述的TMB显色剂储液单元的容积为12ml、所述的终止剂储液单元的容积为12ml。

有益效果：

1. 应用CTGF诊断肝纤维化患者的灵敏度可以达到65.5%，特异度达到91.1%。CTGF为诊断肝纤维化较为敏感的实验室指标。操作简便。

附图说明

图1为本实用新型试剂盒打开状态下的结构示意图。

其中1为试剂区，2为设备区。

具体实施方式：

检测原理：

CTGF是一种具有多种生理功能的细胞因子，作为转化生长因子(TGF-β)的下游作用因子，它主要由成纤维细胞等间质细胞产生，反过来又介导 TGF-β对间质细胞的作用，可促进细胞增生和细胞外基质（ECM）合成、分泌胶原成份等。通过免疫组化和原位杂交等方法已经证实，当肝纤维化时CTGF水平明显增高，并可分泌进入外周血中，血清中的CTGF主要来自于肝脏。当患者为肝纤维化患者时，患者的CTGF会出现大幅的升高。

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结缔组织生长因子（CTGF）水平。首先用纯化的CTGF单体包被微孔板，制成固相抗体；向包被单抗的微孔中加入血清，血清中CTGF与单抗结合后，再与生物素标记的CTGF单体结合，形成抗体-抗原-生物素标记抗体复合物，经过彻底洗涤后，再加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）结合物，最后形成：抗体-抗原-生物素标记抗体-链霉亲和素标记HRP的结合物。经过再次彻底洗涤后，加TMB底物，TMB在HRP的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的CTGF呈正比。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（A值），通过标准曲线计算样品中CTGF浓度。