[实用新型]一种检测水产品中呋喃妥因代谢物的胶体金试剂板

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测水产品中呋喃妥因代谢物的胶体金试剂板，具体涉及一种检测呋喃妥因代谢物的免疫胶体金快速检测试剂板。 

背景技术

呋喃妥因是硝基呋喃类药物的一种，硝基呋喃类药物是一种广谱抗生素，它有非常好的抗菌作用和药动力的特性，因价格较低且效果好，而被广泛应用，作为猪、禽类和水产促生长的添加剂。它主要用来治疗由大肠杆菌或沙门氏菌所引起的肠炎、疖疮、赤鳍病、溃疡病等，药效稳定，能抑制或杀灭多种革兰氏阳性和阴性细菌，并对某些原虫、真菌有一定作用。硝基呋喃类药物被动物服用之后，原药分子在动物体内迅速代谢，其在体内的稳定性不超过几小时，代谢的部分化合物分子与细胞膜蛋白结合成为结合态，结合态可长期保持稳定，从而延缓原药在体内的清除速度。而普通的食品加工方法难以使蛋白结合态残留物大量降解。硝基呋喃类药物具有较强的细胞诱变性和动物致癌毒性，食用含有该残留物的肉制品会对人体产生一定的毒副作用。世界上许多国家限制甚至禁止使用此类药生产动物源性食品，并规定了其在动物源性食品中的检验检疫标准。欧盟已于1995年禁止在食用动物中使用硝基呋喃类抗生素，在动物源性食品中呋喃类残留物的检出限为不得检出。我国也于2002颁布了禁止使用硝基呋喃类抗生素的禁令。2004年底我国进出口食品检验检疫局对出口欧盟的肠衣及肉类产品增加了硝基呋喃(呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃妥因)代谢物项目的检测。尽管我国政府和相关组织对该类药物的残留给予了高度重视，但硝基呋喃类药物在水产动物源性食品中的残留仍时有发生。因此，为了保障人民身体健康，保证进出口水产品的质量，有必要寻求一种快速灵敏方便的筛选检测方法。 

随着社会的发展，人们生活水平质量不断提高，因而人们对食品质量安全问题也越来越重视。为确保进出口及国内市场上动物性食品禽肉、鱼、虾等的食用安全，需要快速准确的残留量分析方法。呋喃妥因在动物体内稳定性较差，在体内很快就能被代谢，呋喃妥因代谢物为1一氨基乙内酰脲(AHD)。代谢物与组织蛋白结合可以形成稳定的化合物，因而在组织中结合的代谢产物(AHD)则能存留较长的一段时间，所以药残监测部门经常以检测其代谢产物一AHD为手段达到检测呋喃妥因残留的目的。 

目前文献报道的呋喃类药物残留的分析方法主要有：高效液相色谱法(HPLC)、液质联用技术(LC-MS)和酶联免疫法。HPLC、LC-MS应用较普遍，精确度和灵敏度高，但因其流程繁琐、设备昂贵、检测速度慢等原因，很难实现现场检测和普及推广。酶联免疫检测法的基础是抗原抗体反应，该法精确、灵敏，检测时间大大缩短，但是ELISA法中酶的活性易受反应条件影响，由此易造成测定结果重复性较差。此外ELISA试剂寿命短，因此需要低温保藏。 

基于抗原抗体特异性反应建立起来的免疫学测定方法灵敏度较高，特异性强，试样预处理简单，分析时间短，使用方便。因此，在现场监控和基层的大规模筛选检测中，免疫学检测方法更实际。 

胶体金免疫层析法是在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，除了具备酶联免疫法的诸多优点外，还克服了酶联免疫法的一些不足。该方法将反应所需要的原料的全部或大部分均已整合到试剂中，反应通常只需数分钟，测试结果以肉眼可见的显色条带来判断。具有简便快速、操作简单、特异性强、不需要额外设备等优点。 

实用新型内容

本实用新型针对检测需求，研制开发一种检测限符合要求，重现性好，检测时间短，适合现场快速检测，技术产品或仪器设备成本较低，运行费用低的快速检测试剂。 

本实用新型试剂板应用层析式抗体免疫竞争原理，通过抗原和金标抗体反应显色，特异性检测水产样品中的呋喃妥因代谢物残留水平。检测样品包括鱼、虾等水产品。如果样品溶液中含有呋喃妥因代谢物残留，呋喃妥因代谢物先和胶体金颗粒上的抗体反应，因此当胶体金颗粒随样品溶液扩散至检测线时，胶体金颗粒上抗体的活性位点因被样品溶液中的呋喃妥因代谢物药物占据而无法与检测线上呋喃妥因代谢物特异性抗原结合；当样品中的呋喃妥因代谢物含量超过试剂板检出限时，试剂板上的检测线显色较控制线浅甚至无显色，判定为阳性。反之，当样品中呋喃妥因代谢物含量在试剂板检出限以下或无残留时，试剂板上的检测线显色与控制线相近或偏深，判定为阴性。 

本实用新型试剂板由上下两块塑料模板和背衬组成，背衬上依次紧密粘贴着样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。相邻各部分间有1-2mm的重叠以保证层析作用从样品垫到吸水垫部位的顺利进行。