[实用新型]一种基于钙离子通道的药物筛选试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种试剂盒，具体来说，特别是涉及一种钙离子筛选试剂盒。

背景技术

Ca²⁺作为细胞内的第二信使，在细胞的生命活动中起着重要作用，不仅直接激活具有重要生理意义的细胞内的机械活动，如肌肉收缩等，同时也作为细胞内第二信便介导第一信使(如激素等细胞外信号)对细胞内的反应，其影响几乎涉及到细胞所有的生理和生化过程，如物质代谢、肌肉收缩、胞吞、胞饮、神经递质释放、染色体移动、DNA合成、细胞分裂以及细胞凋亡等，而且某些疾病的发生和发展都会引起细胞内游离钙浓度(简写为[Ca²⁺])和分布的大幅度变化，甚至因此导致细胞死亡。随着科技和社会的进步，人们对钙代谢、钙通道、钙受体及其调控作用，钙的转运和利用以及钙与某些疾病发生和发展关系的认识越来越深入，研究细胞内Ca²⁺的含量及其时空分布的精确测定方法和技术已是当今化学、生物学、基础和临床医学等学科的一个十分重要的前沿热点研究课题。从20世纪50年代起，人们就开始研究测定细胞内Ca²⁺的方法和技术，先后建立和发展了多种方法，如Ca²⁺激活生物发光蛋白法、有机显色剂法、核磁共振法、放射示踪法、微电极法和荧光探针法等，这些方法各有其优缺点，实际应用时通常要根据各种方法的特点，按照所进行实验的具体要求和目的而选择不同的测定方法，其中荧光探针法是目前最常用的一种方法。

通常细胞内游离钙的浓度[Ca²⁺]仅为10^-7mol/L，而细胞外Ca²⁺浓度高达10^-3mol/L，而且随着细胞的活动，胞质游离钙的浓度还会发生较大变化，正是由于其分布的不均一性及其时空变化构成了细胞内Ca²⁺信号的基础，Ca²⁺作为胞内第二信使对细胞代谢和功能进行调节正是通过胞内游离Ca²⁺含量及分布的变化，以及由此而引发的与蛋白质或酶的特异性结合而实现的。如此大的浓度梯度受细胞膜对钙的通透性和传输性质控制。细胞膜、细胞核、内质网和线粒体上都具有主动的钙转运机制，当胞内钙离子浓度上升时，这些转运系统可以将钙运出胞浆；当胞内钙离子浓度下降时，又能将存贮在“钙库”中的“存贮Ca²⁺”释放入胞质中成为游离钙，从而保持细胞内游离钙浓度Ca²⁺的稳定。

测定细胞内游离钙Ca²⁺测定在技术上的要求：

(1)对活细胞无损伤或生理条件下研究细胞钙，不干扰细胞内正常的生理、生化过程；

(2)灵敏度高，检出限应达10^-7mol/L；

(3)选择性好，由于细胞内其它一些无机离子如Mg²⁺，Na⁺，K⁺等的浓度均在10^-3mol/L水平，故要求测定方法特异性和选择性要强；

(4)响应速度快，为了测定钙浓度的变化，要求测定方法对Ca²⁺浓度变化的响应快于细胞内Ca²⁺信号引起的相关生理和生化反应；

(5)时空分辨率高，能实时、原位地提供胞内各亚细胞区域钙信号聚散涨落的彼此独立又相互关联的信息。