[实用新型]5’-核苷酸酶测定试剂盒有效
申请号: | 201220157404.8 | 申请日: | 2012-04-13 |
公开(公告)号: | CN202626203U | 公开(公告)日: | 2012-12-26 |
发明(设计)人: | 许国和;胡露群 | 申请(专利权)人: | 宁波普瑞柏生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/44 | 分类号: | C12Q1/44 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 刘凤钦;景丰强 |
地址: | 315033 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核苷酸 测定 试剂盒 | ||
技术领域
本实用新型涉及一种5’-核苷酸酶测定试剂盒,属于医疗检测技术领域。
背景技术
医学研究表明,5’-核苷酸酶(5NT)增高主要见于阻塞性黄胆,也可见于肝癌和肝炎。在胆汁淤积并发胆管炎、原发性和继发性胆汁性肝硬化和慢性肝炎时,5NT升高率高于碱性磷酸酶;肝肿瘤和肝肉芽肿时5NT升高的敏感性高于碱性磷酸酶。因为5’-核苷酸酶活性无生理性升高,对于诊断婴幼儿肝病和妊娠性肝功胆汁淤积较碱性磷酸酶不但敏感,而且有特异性。因此测定5’-核苷酸酶的活性对于疾病的诊断具有重要意义。
5’-核苷酸酶的活性测定方法很多,主要有同位素底物法、化学强酸测磷法(1925年)。据申请人了解,目前国际上普遍采用同位素底物测试法,方法为:5’-核苷酸酶作用于H3dUMP,终止反应后,通过离子交换层析柱分析结果,求得5’-核苷酸酶活性。或者利用5’-核苷酸酶作用于单磷酸腺苷后产生无机磷,再用化学强酸法分析无机磷含量得以计算出5’-核苷酸酶的活性。
同位素底物法方法复杂还有同位素污染,而且需要同位素测定仪,因此,难以切实推广应用。无机磷测定法是1925年发明的方法,准确度不好,强酸污染环境等等,也不适合推广应用。
实用新型内容
本实用新型所要解决的技术问题是针对上述的技术现状而提供一种比色法的5’-核苷酸酶测定试剂盒。
本实用新型解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种5’-核苷酸酶测定试剂盒,其特征在于该试剂盒包括一盒体、能启闭盒体的盒盖及并列放置于盒体内的三个第一试剂瓶和三个第二试剂瓶,所述的第一试剂瓶包括呈扁状的第一瓶体和第一瓶盖,前述的第一瓶体上端面凸设形成有与第一瓶盖适配的第一螺纹端口,所述的第二试剂瓶包括呈扁状的第二瓶体和第二瓶盖,前述的第二瓶体上端面凸设形成有与第二瓶盖适配的第二螺纹端口。
便于识别,所述盒体的外表面粘贴有条形码标示。
所述的第一试剂瓶内装有100mmol/L的Good’s缓冲液,2mmol/L的4-AAP,≥0.1KU/L的PNP,≥0.2KU/L的XOD及≥0.6KU/L的POD,所述的第二试剂瓶内装有100mmol/L的Good’s缓冲液,10mmo l/L的5’-IMP及2mmol/L的TOOS。
与现有技术相比,本实用新型的优点在于:试剂瓶组合简单,简化了操作步骤,同时具有储运方便,适合快速测定的优点。
附图说明
图1为实施例结构示意图。
图2为图1的分解图。
图3为图2中第一试剂瓶的放大图。
图4为图2中第二试剂瓶的放大图。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本实用新型作进一步详细描述。
如图1~图4所示,5’-核苷酸酶测定试剂盒包括一盒体4、能启闭盒体4的盒盖及并列放置于盒体4内的三个第一试剂瓶1和三个第二试剂瓶2。盒体4的外表面粘贴有条形码标示41,盒盖包括第一盖体31、第二盖体32和第三盖体33。第一试剂瓶1包括呈扁状的第一瓶体11和第一瓶盖12,第一瓶体11上端面凸设形成有与第一瓶盖12适配的第一螺纹端口111,第二试剂瓶2包括呈扁状的第二瓶体21和第二瓶盖22,第二瓶体21上端面凸设形成有与第二瓶盖22适配的第二螺纹端口211。
第一试剂瓶1内装有100mmol/L的Good’s缓冲液,2mmol/L的4-AAP,≥0.1KU/L的PNP,≥0.2KU/L的XOD及≥0.6KU/L的POD,第二试剂瓶2内装有100mmol/L的Good’s缓冲液,10mmo l/L的5’-IMP及2mmol/L的TOOS。
检验原理:5’-核苷酸酶(5’-NT)是水解5’-IMP生成次黄苷(Inosine)和磷酸盐。次黄苷(Inosine)在嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作用下生成次黄嘌呤,后者在XOD氧化作用下生成尿酸和过氧化氢;最后在POD的作用下,过氧化氢与N-乙基-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(TOOS)、4-氨基安替比林(4-AAP)反应产生紫红色的醌亚胺(Trinder氏反应)。546nm处检测测定吸光度上升的速率来计算出5’-NT的活性。
操作步骤:样本取5μl,添加第一试剂瓶内的试剂180μl,3~5分钟后添加90μl的第二试剂瓶内的试剂,延迟3分钟,检测时间2分钟,理论K值为2983。将反应物置于生化分析仪下,在546nm处检测测定吸光度上升的速率来计算出5’-NT的活性。
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