[实用新型]抗旱因子Lea-like蛋白一步法快速检测试剂盒

说明书

技术领域：

本实用新型涉及一种抗旱因子Lea-like蛋白一步法快速检测试剂盒。

背景技术：

来自于耐辐射异常球菌R1(D.radiodurans R1)的与植物干旱抗性相关蛋白Lea-like属于LEA3家族成员(Makarova，et al.，2001)，在众多微生物中，是种子发育后期产生的一类小分子特异多肽，与植物耐脱水性密切相关，受干旱、高渗、ABA等调节。研究显示lea-like基因的表达能显著提高大肠杆菌的干旱抗性。该基因导入油菜后，明显提高了油菜的抗干旱能力。将转的油菜和非转基因的油菜同时一次性浇足营养液后不再浇水，干旱处理4周后恢复浇水，转lea-like基因的油菜迅速恢复生长，叶片变绿；而非转基因油菜叶片枯黄、萎蔫，不能正常生长。油菜叶片含水量的测定结果同样证明转入lea-like基因的油菜具有抗旱性。在干早胁迫4周时，非转基因油菜的叶片相对含水量降至35.67％，而转基因油菜的叶片相对含水量为72.98％，约为非转基因油菜含水量的2.05倍。目前，编码Lea-like蛋白基因已转入油菜、玉米等作物。

在转基因植物的研制开发或在对转基因产品进行筛选或安全性评价时，往往需要对转入的外源性基因进行定性或半定量测定。现有的检测装置，如酶免、放免等方法的装置，受仪器(酶标仪、放免闪烁仪、离心机等)、场地等因素的限制，而且检测时间长，检测成本较高，很难推广应用。

中国专利ZL201020107248.5提供了一种快速检测耐盐IrrE蛋白的试剂盒，将送检物品的提取液用加样器或滴管滴加在试剂盒的加样孔中即可得到结果，虽然比起上述装置操作简便、快速。但试剂盒的包装中还需要加样器或滴管等加样器械。

实用新型内容：

本实用新型的目的是建立一种操作更加简便、快速，不使用加样器即可进行快捷检测转基因成分的抗旱因子Lea-like蛋白一步法快速检测试剂盒。

本实用新型的技术方案是这样的：

一种抗旱因子Lea-like蛋白一步法快速检测试剂盒，包括底板、具有观测窗的上盖，底板盖入上盖后组成试剂盒，其特征是：底板内表面有测试带，且测试带的一端裸露出试剂盒一侧。

所述底板表面具有一条凹槽，所述凹槽可以嵌入所述测试带的一端。

观测窗分为测试区(T)和质控区(C)两部分，可在上盖上用字母C、T标示出；所述测试带形状为长方形片状，用于检测Lea-like蛋白。

底板的厚度不限，底板的上表面设置一条可嵌入测试带凹槽，凹槽可放置一条测试带。

所述底板或上盖可具有卡槽，以保证底板与上盖扣紧。当底板盖入上盖后，测试带的一端仍裸露在外。主要优点在于更方便快捷，无需加样器械(如移液器、滴管等)测试时，可直接将测试带浸入待检样品溶液中。

所述观测窗优选是长方形。

试剂盒的形状是扁平的半哑铃形盒。

所述测试带是一种具有检测系统主体膜反应体系功能的检测材料，由高分子纤维膜、塑料等多层材料制成。测试带分为质控区和检测区，质控区可包被羊抗鼠IgG或兔抗鼠IgG多克隆抗体；蛋白测试带的样品检测区包被特异功能性Lea-like单克隆抗体或多克隆抗体。

当外源基因转入植物，并在植物中表达，将产生目的蛋白Lea-like，因此通过检测样品中是否含有上述蛋白来确定该基因是否存在。如果外源基因转入植物，发生基因沉默，无目的蛋白产生，将不能达到预期目的。

检测时，只需将试剂盒梳状装置浸入送检物品的提取液中，5sec内取出试剂盒平放，3-5min后，肉眼就可以通过观测窗直接观察到准确的检测结果。

检测结果直观：不借助任何仪器，用肉眼可观察到结果.

应用广泛：可检测玉米、油菜、棉花、水稻、小麦、烟草、大豆等各类农作物的叶片、种子及加工产品。

由于本实用新型提供的抗旱因子Lea-like蛋白一步法快速检测试剂盒检测快速，特别适用于转基因产品的研制开发和转基因产品的快速筛选，可用于实验室、田间、边防、海关植物检验、检验检疫局、食品安全检测及种子经营销售等部门对可疑样本现场、快速筛查。

以下结合附图和实施例，进一步举例说明本实用新型的技术内容。

附图说明：

图1和图2是本实用新型一种联检试剂盒的结构示意图，其中图1是底板的俯视图，底板有一条测试带，且测试带的一端裸露出试剂盒一侧；

图2是试剂盒上盖的俯视图，上盖有一个观测窗；

图中，1是测试带，2是观测窗。

具体实施方式：

实施例1 检测试剂盒的制备