[发明专利]一种根据像素计算DNA片段大小的方法无效
申请号: | 201210595875.1 | 申请日: | 2012-12-25 |
公开(公告)号: | CN103088126A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | 刘林;李成云;张波;杨静;杜云龙;朱有勇;兰茗清 | 申请(专利权)人: | 云南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 650201*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 根据 像素 计算 dna 片段 大小 方法 | ||
1.一种根据像素计算DNA片段大小的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
步骤一,将全式金TRANS DL1000Marker作为已知大小的DNA片段和DL2000Marker上的条带作为未知条带,并对前5条的DNA条带进行分析;
步骤二,分别用7%聚丙烯酰胺凝胶电泳后,采用银染进行染色;
步骤三,拍照后用Adobe Photoshop7.0读取泳距,将条带大小和其对应的泳距输入SPSS的两列作为自变量和因变量,将数据区选中后依次点击分析、回归、曲线估计。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤一中,全式金TRANSDL1000Marker作为已知大小的DNA片段时,条带大小分别为100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、700bp和1000bp。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤一中,DL2000Marker上的条带作为未知条带时,条带大小分别为100bp、250bp、500bp、750bp、1000bp和2000bp。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,7%聚丙烯酰胺凝胶的配方为:尿素7.2g、ddH2O31.25ml、10×TBE6ml、40%Acr-bis10.5ml、10%过硫酸铵0.6ml、TEMED27μl。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤二中,电泳条件为:室温、恒电压120V、电泳时间3小时。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤三中,拍照后用AdobePhotoshop7.0读取泳距时,用鼠标点在有DNA片段的条带正中,便可得出条带在PHOTOSHOP中的像素值,然后再用鼠标点在电泳的起始点,得出起始点处在PHOTOSHOP中的像素值,两者之差便是泳距的大小。
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