[发明专利]一种利用超高压技术制备地钱中金鱼草素的方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种金鱼草素的纯化方法，特别是涉及一种利用超高压技术和大孔吸附树脂富集纯化地钱中金鱼草素的方法。 

背景技术：

地钱苔纲地钱目的代表种，是1753年由林奈命名的苔类植物之一，广布于全世界。别名，巴龙骨、脓痂草、米海苔、地衣；植物体呈叶状体扁平，带状，多回二歧分枝，淡绿色或深绿色，宽约1厘米，长可达10厘米，边缘略具波曲，多交织成片生长。背面具六角形气室，气孔口为烟突式，内有生多数直立的营养丝。叶状体的基本组织厚12～20层细胞；腹面具6列紫色鳞片，鳞片尖部有早心脏形的附着物；假根密生鳞片基部。雌雄异株。雄托圆盘状，波状浅裂成7～8瓣。雌托扁平，深裂成6～10个指状瓣无性繁殖借着生叶状体前端芽胞杯中的多细胞圆盘状芽胞大量繁殖。染色体数n＝8，9，10，11，12和18，多习生于阴湿土坡草丛下或溪边碎石上，有时也生长水稻田埂和乡间房层附近。可用于清热解毒，从地钱植物体中提纯的灰分中含有联苄、环脂和倍半萜烯。此类植物确切的早期化石于1961年在英国的侏罗纪地层中被发现。其主要化学成分为金鱼草素、木犀草素(Luteolin)、莽草酸(Shikimic)、Indodeactic acid、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、2，3，5-Friindobenzoic acid、桂皮酸(Cinuamic acid)、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉。 

金鱼草素是以中国大兴安岭原始森林里所生长的野生地钱为原料，近年来，人们发现天然植物地钱中含有大量的金鱼草素，从中提取金鱼草素并且取得了可喜进展。金鱼草素具有解毒，祛阏，牛肌  用于外用治烧烫伤，骨折，毒蛇咬伤，疮痈肿毒，臁疮，癣。国内提取金鱼草素技术大多是有机溶剂提取，虽然提取率高，但提取时间长；而采用的超高压技术制备金鱼草素，其技术远比有机溶剂提取效很高，在结合大孔树脂吸附技术，能有效的从地钱中提取金鱼草素，使其有效含量高达90％以上。 

发明内容：

本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种利用超高压技术和大孔吸附树脂富集纯化地钱中金鱼草素的方法。 

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是： 

一种利用超高压技术和大孔吸附树脂富集纯化地钱中金鱼草素的方法，其步骤如下： 

(1)将干地钱粉碎，加入乙醇，浸泡1小时后放入耐压袋中，在20℃条件下处理，超高压压力在200-400MPA之间，时间在4-8min，回收乙醇，在60℃～70℃真空干燥得金鱼草素粗提物； 

(2)将所得金鱼草素粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，吸附为静态吸附或动态吸附； 

(3)用30％～90％不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集金鱼草素各阶段洗脱液； 

(4)将金鱼草素各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，得金鱼草素半成品，其含量在30％以上. 

(5)将所得金鱼草素半成品粉末溶于甲醇，加适量硅胶搅拌，烘干过60-80目筛，干法上样，上工业级柱200-300目硅胶柱层析； 

(6)以丙酮、甲醇在1～6∶1条件下进行梯度洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集金鱼草素各阶段洗脱液，减压浓缩，回收溶剂； 

(7)所得浓缩液在60℃～80℃下进行真空干燥； 

(8)将干燥后的产品用70％-80％乙醇溶解，浓缩到原体积的十分之一，放置过夜得晶体体：分离晶体将剩余物用50％-60％乙醇溶解，再次浓缩，重结晶，如此反复两次，得到精制的金鱼草素，其含量在90％以上。 

所述的步骤(1)中，干地钱粉碎后过40～80目筛。 

所述的步骤(1)中，加入乙醇的浓度为80％-90％。 

所述的步骤(1)中，加入乙醇的体积为物料粉碎体积的10-20倍 

所述的步骤(2)中，所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X-5、NKA-9、S-8、D3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-II型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态吸附。 

所述的步骤(8)中，加入乙醇的体积为干燥后产品的10-12倍。 

本发明应用超高压技术和大孔吸附技术分离纯化金鱼草素，对金鱼草素的提取速度快，节省时间，提取率高，利用大孔树脂分离纯化分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量30％以上的金鱼草素半成品和含量90％以上的金鱼草素终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。