[发明专利]一种支原体培养基

说明书

技术领域

本发明涉及检验口腔微生物培养领域，具体涉及一种支原体培养基。

背景技术

非淋球菌性尿道炎(nongonococcal urethritis，NGU)在性传播疾病(sexuallytransmitted disease，STD)中所占的比例逐年升高，无论是国外还是国内都居于首位，而解尿支原体(ureaplasma urealyticum，Uu)和人型支原体(Mycoplasmahominis，Mh)是NGU的主要病原体。因此，准确有效地检测支原体的存在，成为诊断NGU的关键因素之一。Uu和Mh的检测目前国内大多采用液体培养法，培养基由黄变红且液体澄清为阳性，不变色或者变色但液体浑浊为阴性。其原理是根据Uu和Mh分解培养基中的尿素产碱使pH上升，而培养基中的酚红指示剂在由酸变碱过程中颜色由黄变红，观察颜色的变化来判断阳性。但是能分解尿素的微生物很多，一些细菌能使颜色变红造成假阳性，还有一些细菌和真菌(尤其是白色念珠菌)能使培养基变红和浑浊，检验科一般会判断阴性，但如果其中同时有支原体生长，由于浑浊就会造成假阴性的判断。前国内商品化的支原体培养基(包括液体和固体)一般添加青霉素类和多粘菌素，青霉素对大多数革兰阳性球菌的作用较强，对肠球菌作用较差，多粘菌素为多肽类抗生素，对绿脓杆菌等革兰氏阴性杆菌作用强大，但对G-球菌和G+细菌均无作用，这两种对真菌都无抑制作用。所以，如果标本中有混合真菌感染，污染少量则仅变红而不造成沉淀，可能形成假阳性的判断；污染量多有沉淀和浑浊，可能形成假阴性的判断。在固体培养基上，真菌菌落的生长，会掩盖支原体生长的琼脂表面，使不能观察到支原体的典型菌落。

发明内容

本发明的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种适合于支原体生长的培养基，降低检验结果的假阳性和假阴性发生率。

本发明解决其技术问题的技术方案是：一种支原体培养基，其特征在，配制1000ml培养基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；酵母浸粉5g；苯酚红20mg；氯化钠5.2g；L-精氨酸0.5g；氟康唑30mg；紫番荔枝素2mg；无菌绵羊血200ml；蒸馏水加至1000ml。

优化方案中，每1000ml培养基还含有京尼平酸2mg。

优化方案中，每1000ml培养基还含有浓度200g/L的功劳木水煮液200ml。

以上各方案的固体培养基配方中，每1000ml培养基还含有琼脂15g。

其中所述的蛋白胨提供碳氮源和能量；牛心浸粉含有各种多肽、脂肪、生长因子、激素等，这些物质对促进支原体的繁殖和生长都是很重要的因素；酵母浸粉提供支原体生长所需的维生素B族；氯化钠维持均衡的渗透压，且由于支原体较其他的细菌更为耐受高渗环境，所以氯化钠水平适当的提高还有利于抑制其他细菌生长；琼脂是培养基的凝固剂；无菌绵羊血提供能量环境；L-精氨酸属氨基酸类，为营养剂；苯酚红为指示剂；氟康唑可以有效的抑制白色念珠菌在其中的生长；紫番荔枝素有抑制白假丝酵母的真菌作用，且还有一定的细胞毒作用，2mg/L的浓度可以有效的抑制杂菌成长，较普通支原体培养集中使用的高毒醋酸铊安全。京尼平酸能广泛抑制革兰氏阴、阳性菌的生长。功劳木为小檗科植物阔叶十大功劳、细叶十大功劳的茎或茎皮，现代研究表明，功劳木水煎剂在体外对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌均有抑制作用。

本发明与现有技术相比较，具有支原体检出可靠的特点。

具体实施方式

以下结合实际情况，对本发明的具体实施方式作详细说明。

实施例1液体培养基，配制1000ml培养基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；酵母浸粉5g；苯酚红20mg；氯化钠5.2g；L-精氨酸0.5g；氟康唑30mg；紫番荔枝素2mg；无菌绵羊血200ml；蒸馏水加至总量为1000ml。同配方中加入琼脂15g既可以用来制备实施例2固体培养基。

实施例3液体培养基，配制1000ml培养基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；酵母浸粉5g；苯酚红20mg；氯化钠5.2g；L-精氨酸0.5g；氟康唑30mg；紫番荔枝素2mg；京尼平酸2mg；无菌绵羊血200ml；蒸馏水加至总量为1000ml。同配方中加入琼脂15g既可以用来制备实施例4固体培养基。