[发明专利]一种毕赤酵母菌及其在饲料发酵中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种菌株，特别涉及一种用于发酵饲料的毕赤酵母菌。

背景技术

酵母菌是人类利用最早、利用数量最大的一种单细胞微生物，是理想的营养源和食品原料，也是优质蛋白饲料源。酵母菌属于真核微生物，不是人和动物肠道的固有菌，但可以产生多种消化酶类，可以在消化道内代谢。作为益生菌使用的酵母则是以活细胞的形式，通常为酵母培养物。在饲料工业应用中，目前使用的菌种主要是芽孢杆菌和乳酸菌及其混合物。但存在抗生素的使用受到限制的问题，酵母菌既不会干扰抗生素的作用，又可以增加饲料的稳定性，作为消化剂还有助于提高营养物质的利用，因此酵母菌在饲料工业中有很高的应用价值。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一株用于发酵饲料的毕赤酵母菌。该毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003，已于2012年12月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，保藏号为：CGMCC No.6930，它可以用在发酵饲料以及微生态制剂，是一种极具应用价值的益生菌。本发明通过试验表明：毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003可产生多种代谢产物，发酵液具有浓郁的苹果香气，从而增加发酵饲料的适口性，提高采食量，其中含多种代谢产物可以促进猪的消化，提高饲料利用率，促进猪的快速生长。

本发明的优势是：毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003有很强的耐酸性，可以在pH值为2的条件下缓慢生长；可以产生高含量的乙酸乙酯，具有独特的苹果香气，用在发酵饲料中可以增加适口性，提高采食量；用于发酵饲料中使发酵饲料的蛋白含量及水解酶类大大增加，促进动物消化吸收，提高饲料利用率，促进动物生长。

附图说明

本发明有如下附图：

图1　毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003菌落形态照片；

图2  毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003显微镜下形态图；

图3  毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003生长曲线图；

图4  毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003 26SrDNA D1/D2区域序列通过BLAST对比构建的系统进化树；

图5  毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003 26SrDNA D1/D2区域电泳图。

具体实施方式

下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。

实施例1

毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003的获得及其培养条件检测

毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003的筛选与鉴定

1）毕赤酵母（Pichia jadinii）Hzd-pj-003的筛选

从山东平度南村镇农户家堆积的陈年花生壳中，选取表面有些发酵迹象的作为样本，无菌水浸泡，采用梯度稀释涂平板的分离法，将花生壳溶液梯度稀释10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5后，各吸取0.1mL涂于PDA培养基上对菌株进行分离，28℃恒温培养箱中培养2-3 d，挑取PDA培养基上菌落形态为乳白色、光滑、菌落直径为3～5mm左右的单菌落反复进行划线分离直至纯化，如图1所示。

所述的PDA培养基配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL。将200g马铃薯去皮切碎，煮烂后过滤得到马铃薯汁，加入20g葡萄糖，加入琼脂15～20g，加水至1000mL，121℃灭菌20min。

2）菌种的鉴定

菌株纯化后PDA培养基平板上菌落形态为乳白色、光滑、单菌落直径为3～5mm左右的初筛菌株进行鉴定。

菌株细胞为真核细胞，单个菌体呈椭球状，从显微镜下清晰可见细胞核和液泡，有的处于分裂期细胞有两个细胞核，有的能看到出芽生殖，如图2所示。

培养特征

固体培养特征：菌株在28℃培养条件下连续培养2 d，在PDA固体培养基表面形成直径3-5mm左右的光滑乳白色菌落。

所述的PDA固体培养基配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL。