[发明专利]CREB5基因的用途

说明书

技术领域:

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及CREB5基因的用途。 

背景技术：

结核病（Tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染性疾病，结核分枝杆菌不仅可引起肺结核（85%），而且可引起肺外多种器官的结核病。尽管目前已有有效的抗结核药物，但结核病仍然是当前感染性疾病的头号杀手，全球每年约200万人死于结核病；全球约三分之一的人口感染结核分枝杆菌，在这些被称为结核菌潜伏感染（LTBI）的人群中，有约10%最终将进展为活动性结核病。 

由于目前缺乏有效的结核病疫苗，结核病的预防控制主要依赖于早期发现、治疗、隔离活动性结核病人。然而，现今诊断活动性结核病的检测技术存在严重不足，不能满足临床和结核病预防控制的要求：1）痰结核分枝杆菌微生物检查特异性高，是当前诊断活动性肺结核的金标准，但存在敏感性低（不足40%），耗时长（结核菌培养耗时1－2个月），实验室生物安全要求高的缺点。2）结核分枝杆菌基因检测，虽然实现了快速诊断的目的（1天），但直接从痰标本进行的基因检测在敏感性方面没有显著提高，且存在假阴性，假阳性的问题。3）免疫学检测中抗体检测被世界卫生组织认定不适合结核病的诊断； 细胞免疫学检测包括结核菌素皮试（TST）和结核菌干扰素释放试验（IGRA），不能有效判别活动性结核患者和结核菌潜伏感染者，虽然后者在活动性结核患者检测的敏感性显著高于其他检测。 

CREB5也叫CRE-BPA,CRE-BP alpha，cAMP反应元件结合蛋白，可以激活转录，它包含一个锌指和一个亮氨酸拉链DNA结合结构域，目前对该基因的功能的研究甚少。 

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种CREB5基因的用途，CREB5基因可作为判别结核潜伏感染和活动性结核的分子标志物。 

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现: 

本发明提供了一种CREB5基因的用途，用于制备判别结核潜伏感染和活动性结核的产品。 

所述判别结核潜伏感染和活动性结核的产品优选包括：用实时定量PCR或基因芯片检测判别结核潜伏感染和活动性结核的产品。 

所述用实时定量PCR判别结核潜伏感染和活动性结核的产品优选至少包括一对特异扩增CREB5基因的引物。 

所述特异扩增CREB5基因的引物，优选为： 

CREB5-F：5’-AAGGTCTGGGTGATGTCATTG-3’， 

CREB5-R：5’-ATGGCTGTTATTGGGCAGTC-3’； 

所述用基因芯片检测判别结核潜伏感染和活动性结核的产品优选包括：与CREB5基因的核酸序列杂交的探针。 

利用本发明的试剂盒，可以检测病人CREB5基因的表达情况，从而诊断病人是否患有活动性结核病。 

在本发明中，术语“引物”是指一种寡核苷酸，可以是天然的也可以是合成的，它可以作为在一定条件下诱发DNA合成的起始点，在合适条件下诱发合成与核酸链互补的引物扩增产物，即在四种不同的三磷酸脱氧核糖核苷及一种聚合试剂（即DNA聚合酶或逆转录酶）存在下，在一种合适的缓冲液中并在合适的温度下进行扩增反应。优选的引物是单股寡脱氧核糖核苷酸。引物的合适长度取决于该引物的设计用途，但一般在15～25个核苷酸之间。 

在本发明中，所述探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物，所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。 

经实验证明，本发明CREB5基因在结核病人血液中的表达明显高于健康人群以及潜伏感染人群，因此CREB5基因可作为诊断结核的特异标志基因，使结核诊断更加准确、快速。 

附图说明：

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。 

图1是本发明实施例1的CREB5基因在人外周血单个核细胞(PBMC)中差异表达的定量RT-PCR结果图。 

图2是本发明实施例2的CREB5基因在PBMC中差异表达的芯片结果图。 

具体实施方式：

下面结合实施例和附图对本发明进行进一步描述： 

实施例1 

本实施例将人群分为三组：结核病患者、潜伏感染人群和健康人群（各20例），通过检测每例外周血单个核细胞(PBMC)中CREB5基因mRNA变化，发现其在结核病患者中呈明显的上调表达趋势。