[发明专利]同时检测樱桃是否感染苹果褪绿叶斑病毒和李属坏死环斑病毒的方法及专用引物

权利要求书

1.一种用于检测植物病毒的引物，为引物对甲和引物对乙；

所述引物对甲为检测苹果褪绿叶斑病毒的引物对，一条引物序列如SEQ ID No.1所示，另一条引物序列如SEQ ID No.2所示；

所述引物对乙为检测李属坏死环斑病毒的引物对，一条引物序列如SEQ ID No.3所示，另一条引物序列如SEQ ID No.4所示。

2.一种辅助检测樱桃是否感染苹果褪绿叶斑病毒和/或李属坏死环斑病毒的方法，包括如下步骤：以待测樱桃的叶片的反转录cDNA为模板，用权利要求1中所述引物对进行PCR扩增，检测PCR扩增产物，若所述PCR扩增产物为大小分别为632bp和455bp的两个条带，则待测樱桃候选为同时感染苹果褪绿叶斑病毒和李属坏死环斑病毒；若所述PCR扩增产物仅为大小为632bp的条带，则待测樱桃候选为感染苹果褪绿叶斑病毒；若所述PCR扩增产物仅为大小为455bp的条带，则待测樱桃候选为感染李属坏死环斑病毒；若所述PCR扩增产物中无大小分别为632bp和455bp的两个条带，则待测樱桃候选为没有感染苹果褪绿叶斑病毒和李属坏死环斑病毒。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述用权利要求1中所述引物对进行PCR扩增的方法为：先用所述引物对甲进行PCR扩增，10个循环后，再加入所述引物对乙继续进行PCR扩增，直至扩增结束。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系中每条引物的浓度为0.5μM；所述PCR扩增的退火温度为57℃。

5.含有权利要求1所述引物的用于检测苹果褪绿叶斑病毒和/或李属坏死环斑病毒植物病毒的试剂或试剂盒。

6.权利要求1所述引物或权利要求5所述的试剂或试剂盒在检测苹果褪绿叶斑病毒和/或李属坏死环斑病毒植物病毒中的应用。