[发明专利]msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株有效
申请号: | 201210585414.6 | 申请日: | 2012-12-31 |
公开(公告)号: | CN103013900A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 余琼 | 申请(专利权)人: | 黑龙江大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150080 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | msct acap5 融合 蛋白 转基因 工程 菌株 | ||
1.msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株,其特征在于msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株名为大肠杆菌BL21(DE3-msCT/AcAP5),大肠杆菌BL21(DE3-msCT/AcAP5)按以下步骤制备:
一、将含有msCT-AcAP5融合蛋白基因的质粒载体pUC(msCT/AcAP5)用BamH I和EcoRⅠ双酶切,获得msCT-AcAP5融合蛋白的DAN片段;
二、用BamHI和EcoRⅠ双酶切质粒pGEX-6P-1;
三、msCT-AcAP5融合蛋白的DAN片段与经过双酶切的载体pGEX-6P-1进行酶连接,然后16℃放置连接过夜,得到载体pGEX-msCT/AcAP5;
四、用载体pGEX-msCT/AcAP5转化大肠杆菌BL21(DE3),选择阳性重组子,即获得msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌大肠杆菌BL21(DE3-msCT/AcAP5)。
2.根据权利要求1所述的msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株,其特征在于步骤一中质粒载体pUC(msCT/AcAP5)酶切反应体系为
3.根据权利要求1所述的msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株,其特征在于步骤二中质粒pGEX-6P-1酶切反应体系为
4.根据权利要求1所述的msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株,其特征在于步骤三中酶连接反应体系为
5.根据权利要求1所述的msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株,其特征在于步骤一中msCT-AcAP5融合蛋白的基因序列如SEQ ID NO:1所示。
6.根据权利要求5所述的msCT-AcAP5融合蛋白转基因工程菌株,其特征在于步骤一中msCT-AcAP5融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
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