[发明专利]一种冬青属植物杂交育种的方法

权利要求书

1.一种冬青属植物杂交育种的方法，其特征在于：包括如下步骤： 

(1)授粉：结合扦插育苗进行授粉。分别选取冬青属植物雌株和雄株的当年生顶稍作为插穗，选择合适的扦插池进行扦插，扦插池大小约4m²，扦插密度5cm×5cm，分别扦插两个品种400株，扦插时间7月上旬，处理方法1000mg/L IBA浸泡插穗基部50s。扦插后60d，在插穗叶面喷施低浓度钾肥(350mg/LKH₂PO₄)，同时制作硫酸纸为面板的方盒罩住整个扦插池。 

(2)种子采收：待果实成熟后，即红果皮开使变软时，将带红果皮种子采摘。 

(3)果皮处理：晾晒一周后，通过揉搓的方法去除果皮，获得净种子。 

(4)辐射处理：将步骤(3)中得到的杂交种子，进行30Gy剂量钴60辐射处理； 

(5)试管培养：将步骤(4)中所得辐射诱变过的种子，进行消毒处理后接入试管培养基中进行培养以打破种子休眠，培养时间60-90d，培养温度为20-26℃，光照时间为10-16h/d，光照强度为1600-2000Lx； 

(6)试管苗的驯化炼苗：将步骤(5)所得冬青属杂交种无菌苗的培养瓶瓶盖打开，露天培养2-3d，然后移入采用多菌灵(稀释浓度2g/L)消毒的基质中，组培苗上方使用带孔PVC膜覆盖保湿，驯化容器采用50孔穴盘，放在通风阴凉处培养25-30天，培养到第15d将PVC膜移除，换用折光率75％的遮阳网；所述基质成分为体积比1∶1的泥炭土与珍珠岩。 

2.根据权利要求1所述冬青属植物杂交育种的方法，其特征在于：步骤(5)中所述培养基为WPM培养基并添加赤霉素浓度为3mg/L。 

3.根据权利要求1所述冬青属植物杂交育种的方法，其特征在于：步骤(5)中进行消毒过程为：用清水冲洗干净，用毛刷蘸少许洗衣粉将其表面刷洗干净，再用自来水漂洗3-5次，然后用“安利”洗液震荡漂洗30min，接着用自来水流水冲洗30min，于无菌操作台上用75％乙醇消毒50-60s，无菌水冲洗1次，立即倒入84消毒液原液消毒5min，用无菌水洗涤3次，每次1min，随后倒入0.1％的升汞消毒5min，最后用无菌水洗涤4次，每次振荡3-5min。 

4.根据权利要求1至3任一所述冬青属植物杂交育种的方法，其特征在于：所述培养基中均含有琼脂6.5g/L、蔗糖30g/L，且pH值为6.0。