[发明专利]CZ-81白耙齿菌提取物中肽含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及肽含量测定，特别是涉及CZ-81白耙齿菌提取物中肽含量的测定方法。

背景技术

多肽细胞因子主要控制人体的生长发育、免疫调节和新陈代谢，它在人体处于一种平衡状态。若多肽细胞因子减少，人体的机能发生重要变化。对于儿童来说，他的生长、发育变得缓慢，甚至停止，长久下去就形成了侏儒；对成年人或老年人，缺少活性肽后，自身的免疫力就会下降，新陈代谢紊乱，内分泌失调，引起各种疾病的产生。由于多肽细胞因子还作用于神经系统，因此人体就会变得动作迟缓，更主要的是多肽细胞因子减少，会直接引起人身体各部位逐渐出现全面衰老，引发各种疾病。

人体很多活性物质都是以肽的形式存在的，经研究发现人体干重的70％以上都是蛋白质。所以说没有肽，就没有活性，就没有生命。肽涉及人体的激素、神经、细胞生长和生殖各领域，其重要性在于调节体内各个系统和细胞的生理功能，激活体内有关酶系，促进中间代谢膜的通透性，或通过控制DNA转录或影响特异的蛋白合成，最终产生特定的生理效应。肽是涉及人体内多种细胞功能的重要物质。肽可以合成细胞，并调节细胞的功能活动。肽在人体作为神经递质，传递信息。肽可在人体作为运输工具，将人体所食的各种营养物质与各种维生素、生物素、钙及对人体有益的微量元素输送到人体各细胞、器官和组织。肽是人体重要的生理调节物，它可全面调节人体生理功能，增强和发挥人体生理活性，它具有重要的生物学功能。肽对人的细胞活性、功能活动、生命存在太重要了。但现代人因各种因素使人体中的肽流失、损失，合成肽的能力大大减弱，因此现代人体缺乏肽，必须补充人工合成肽，补肽就是补活性，补肽就是补活力，补肽就是补生命。

真菌中含有丰富的氨基酸、多肽、蛋白质类成分，这不仅可供人体营养，还是衡量真菌食用价值的一个重要指标。而且某些真菌中的氨基酸、多肽、蛋白质类的生物活性早已引起了人们的注意，特别是近些年来对药用真菌的蛋白质类成分的研究，从中发现其抗癌的活性，更进一步激发了人们对药用真菌这类成分的兴趣。真菌耙齿菌中所含有肽的成份是对人体肽的缺失给予适宜的补充，促进肾小球细胞合成，并调节细胞的功能活动，恢复和增强肾小球的生理功能。耙齿菌是一种生长在长白山密林深处的一种真菌，经过对多种耙齿菌的分离与筛选，取其中白耙齿菌进行再次分离得出一种特殊菌珠，即白耙齿菌CZ-81菌珠。这是经人工培养的一种真菌生物工程深层发酵培养的高性能菌种。经过多年选育和培育，现已成为稳定性强，代谢能力高，安全性高的菌种，是益肾康胶囊的唯一原料成份。

通过将耙齿菌中的特殊菌珠CZ-81白耙齿菌经过生物发酵、提取其精华，制成胶囊剂，应用在临床上，其对肾小球肾炎有其特殊的疗效。经研究发现，CZ-81白耙齿菌提取物中所含有的多肽成分能有效地表达产品的质量与疗效。但现有技术中并没有相应的多肽成分含量的检测方法，无法对由CZ-81白耙齿菌制成的胶囊剂的质量参数进行准确表达。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供CZ-81白耙齿菌提取物中肽含量的测定方法。

CZ-81白耙齿菌提取物中肽含量的测定方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备

取牛血清白蛋白加水，制成每1ml水含0.3mg牛血清白蛋白的溶液，得到对照品溶液；

2)供试品溶液的制备

取CZ-81白耙齿菌提取物适量，精密称定，加水溶解成每1ml水含3mgCZ-81白耙齿菌提取物的溶液，充分振摇不小于十分钟，过滤，得到供试品溶液；

3)标准曲线的绘制

精密量取对照品溶液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分别置于具塞试管中，各加水至1.0ml；再分别向其中加入碱性铜试剂1.0ml，摇匀，室温放置10分钟后，向其中分别加入福林酚试剂40ml，摇匀，于55℃水浴中保温5分钟，取出，放冷至室温；以0.0ml对应的管为空白试验管，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)在650nm波长处测定吸光度，以牛血清白蛋白与对应的吸光度计算回归方程；

4)测定

精密量取供试品溶液1.0ml，向其中加入碱性铜试剂1.0ml，摇匀，室温放置10分钟后，向其中加入福林酚试剂40ml，摇匀，于55℃水浴中保温5分钟，取出，放冷至室温；以标准曲线0.0ml对应的管为空白，在650nm波长处测定吸光度，从回归方程中计算肽含量。