[发明专利]一种高效表达乳酸脱氢酶C4的工程菌及其表达方法

权利要求书

1.SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

2.一种重组载体，其特征在于：它包括SEQ ID NO.1或所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：它是pET32a重组载体。

4.一种重组菌，其特征在于：它包括权利要求2或者3所述的重组载体。

5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：它为重组大肠杆菌。

6.一种制备重组蛋白的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

（1）取权利要求4或者5所述的重组菌，在大肠杆菌培养基中培养，诱导表达，得菌液，离心，得菌体；

（2）取步骤（1）所得菌体，超声裂解，离心，得上清，上清分离纯化，即得。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述重组菌是在含有氨苄霉素的LB液体培养基中振摇培养，培养温度为37℃，诱导表达使用的诱导剂为IPTG，诱导温度为25℃，诱导时间为10h。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述分离纯化采用蓝胶亲和柱层析与离子交换层析。

9.权利要求6~8任意一项所述方法制备的重组蛋白。