[发明专利]一种淋球菌快速检测试剂及检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及淋球菌的快速检测试剂，以及包含该试剂的检测试剂盒。该试剂盒用于检测患者尿液(初段尿)、宫颈分泌物（女性）或尿道分泌物（男性）中的淋球菌。

背景技术

淋病目前是我国最为常见的性传播疾病之一，其病原体是淋病奈瑟氏菌（简称淋球菌）。人是淋球菌的惟一自然宿主，淋球菌通常寄居于粘膜表面的柱状上皮细胞内，其主要致病物质包括菌毛、外膜蛋白、蛋白酶、脂多糖等，主要通过性接触直接感染泌尿生殖道、口咽部和肛门直肠粘膜，或在分娩时通过产道感染新生儿，临床表现为单纯性淋病、盆腔炎、口咽部和肛门直肠病、淋菌性结膜炎及播散性淋病。因此，对淋病的早期诊断和治疗十分重要。

淋球菌感染后约有1%男性无任何症状，75%的女性患者无症状，因此，仅凭有无临床症状作为判断是否感染淋球菌的依据，漏诊率极高，尤其是女性，所以建立准确可靠的检测方法十分必要。目前，淋病的诊断方法主要有培养法和非培养法。这几种方法从检测灵敏性，特异性，临床实用性都各有优缺点。

一、细菌培养法：淋球菌为需氧菌，营养要求高，常用含多种氨基酸、血液以及万古霉素和多粘菌素的选择性培养基培养，经35℃，5%CO₂培养箱内培养24～48小时。淋球菌在不同培养基上所形成菌落的大小，透明度不尽相同。在巧克力琼脂培养基上，菌落呈圆形，凸起、湿润、光滑，半透明或灰白色，边缘整齐，直径约0.5～1.0mm。继续培养有时可形成表面粗糙和锯齿状边缘的菌落。细菌分离培养是目前诊断淋病最可靠的手段，是诊断淋病的重要佐证，培养法对症状很轻或无症状的男性、女性患者都是比较敏感的方法，只要培养阳性就可确诊。因为淋球菌对营养要求高，对理化因素的抵抗力差，离体后很快死亡并自溶，因此细菌分离培养检测淋球菌阳性率低，另外此法还受操作技术和培养条件等客观因素影响。

二、涂片G染色：取采集的分泌物立即涂片，且厚薄均匀适宜，待自然干燥后进行革兰染色。在油镜下观察20个视野，淋病奈瑟氏双球菌染成红色或粉红色，形态为肾形对称或半圆形对称排列，以单个或成团位于细胞内或细胞外，镜检查革兰阴性双球菌。涂片G染色镜检，此方法受取材、涂片、染色等各种因素影响，且镜下淋病双球菌极易与其它的革兰氏阴性双球菌混淆，易发生误诊和漏诊。

三、PCR检测法：PCR为聚合酶链反应，属一种基因诊断技术，它借助于一种DNA扩增技术，能将体内微量的淋球菌扩增，每次实验均做阴阳性对照，阴阳性结果符合要求，才能发出报告，此方法简便、快速，只需2-3小时即可出结果。PCR技术对标本采集的要求远不如细菌培养那么严格，它不管细菌是死是活都可以检测出来，可克服使用抗生素后其他方法检测不出的问题，同时由于PCR的放大作用，也可以克服标本数量少检测不出的问题。由于PCR技术具有敏感性高的特点，极微量污染可导致假阳性结果，敏感性和特异性差异很大，故不适于医院常规诊断。总之，该方法存在操作步骤繁琐、费用高、易污染、假阳性和假阴性较多等问题，为大规模开展淋球菌高危人群的筛查带来不便。

四、特异性标态酶试验：主要包括1.氧化酶试验：淋球菌氧化酶阳性，但氧化酶阳性者并不一定是淋球菌。细菌经培养后形态疑似淋球菌，若氧化酶试验呈阳性，可初步鉴定为淋球菌。2.过氧化氢酶试验：淋球菌可产生过氧化氢酶。该酶能使过氧化氢迅速分解成水和氧气，出现气泡。用作淋球菌的初步鉴定。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种无需任何仪器设备，操作简便快速、灵敏度高且结果易判断的淋球菌检测试剂盒以及该检测试剂盒中应用到的试剂。

本发明中的淋球菌快速检测试剂所采用的技术方案是：所述淋球菌快速检测试剂按质量百分比计算，它包括以下组分：过氧化氢  8～15%；吐温-80  0.1～0.2%；稳定剂  0.02～0.05%；余量为蒸馏水；各组分之和为100%。

具体地，按质量百分比计算，它包括以下组分：过氧化氢  15%；吐温-80  0.2%；稳定剂  0.02%；蒸馏水 84.78%；或者按质量百分比计算，它包括以下组分：过氧化氢  8%；吐温-80  0.1%；稳定剂  0.05%；蒸馏水 91.85%；或者按质量百分比计算，它包括以下组分：过氧化氢  12%；吐温-80  0.15%；稳定剂  0.03%；蒸馏水 87.82%。

所述稳定剂为磷酸、稀硫酸或苯甲酸。

所述过氧化氢的浓度为5～15%，所述吐温-80的浓度为0.1～0.2%。

所述吐温-80即是聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯，简称聚山梨酯-80。