[发明专利]一种菝葜水溶性成分的含量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药材的质量控制领域，尤其涉及中药材菝葜或同属植物水溶性成分的含量检测方法，还包括原料含有菝葜的中药制剂的水溶性成分的含量检测方法。

背景技术

菝葜为百合科植物菝葜（Smilax china L.）、长托菝葜（S.ferox Wall.ex Kunth）、黑果菝葜（S.glauco-china Warb.）、托柄菝葜（S.discotis Warb.）、小果菝葜（S.davidiana A.DC）、西南菝葜（S.biumbellata Warb.）、柔毛菝葜（S.chingii Wang et Tang）、红果菝葜（S.polycoleaWarb.）等植物的干燥根茎。秋末至次年春采挖，除去须根，洗净，晒干或趁鲜切片，干燥。味甘，微苦涩，性平，归肝肾经。传统医学认为其根茎具有药用价值，具有祛风利湿、解毒散瘀的功效，可用于治疗筋骨酸痛、小便淋漓、带下量多和疔疮痈肿。

菝葜为《中国药典》自2005年版开始收载的品种之一，其[含量测定]项下选用薯蓣皂苷元作为含量测定指标，用酸水解法测定其中薯蓣皂苷元的含量。

“气相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元含量”【参见刘杨、王永庆、邱宁婴等.气相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元含量[J].江苏药学与临床研究，2004，12(4):14~15）】报道了一种气相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元含量的方法，通过测定薯蓣皂苷元的含量对中药材菝葜的质量进行控制。

申请号为200510200269.5的中国专利申请公开了一种中药菝葜提取物的制备方法和质量控制方法，所公开的质量控制方法中是采用液相色谱法测定菝葜中薯蓣皂苷元含量的方法，从而通过测定薯蓣皂苷元的含量对中药材菝葜的质量进行控制。

薯蓣皂苷经酸水解生成含有27个碳原子的薯蓣皂苷元，薯蓣皂苷与纤维素结合存在于细胞壁中，由于植物细胞壁比较坚韧，因而经典的酸水解法仅能提取1/4的皂苷元。目前总皂苷水解方法主要采用酸水解，另外还有采用两相溶剂水解法和生物水解法。在酸水解过程中，值得注意的问题是常有副反应发生，一是若用盐酸水解则有可能发生羟基氯代；二是薯蓣皂苷元易脱水转变为Δ^3,5-deoxytigogenin，其所得量可随酸的浓度、供试品稀释程度增加而增加，而且苷比苷元更容易形成脱水产物。此外，还可发生25S转25R构型的差向异构化，产生Ｃ₂₅-epimer及Ｆ环开环的化合物等，因此要注意控制好水解条件（聂凌鸿,林淑英,宁正祥.薯蓣属植物中薯蓣皂苷元的研究进展[J].中国生化药物杂志,2004,25(5):318~320）。菝葜药材中大量的纤维素和淀粉的存在对水解有干扰作用，因而薯蓣皂苷元的收率低，对于菝葜的含量测定有很大的影响，也影响菝葜含量测定的准确性，同时考虑到薯蓣皂苷元为水解产物，因系水解产物且为非专属性成分，目前药品技术法规也不提倡使用水解产物作为含量测定指标，在实际检验操作中发现，上述方法存在专属性差、操作繁琐、可控性差、含量测定结果稳定性差等诸多不足，严重影响标准的可操作性。

为此本发明人在对菝葜开展系统植化研究的基础上，将其含量测定指标选定为稳定可控的二氢黄酮醇苷类的活性成分落新妇苷和黄杞苷，提出了申请号为200810089423.X、发明名称为“一种菝葜的质量控制方法”的发明专利申请，并获得了发明专利权。在此基础上将其[含量测定]指标修订为测定其中主要二氢黄酮醇苷类代表性成分落新妇苷和黄杞苷，专属性有了显著提高，并列为《中国药典》2010年版标准。

经过本发明人进一步研究，菝葜的质量检测方法可进一步提高。菝葜作为常用大宗药材，临床应用非常广泛，且该属不同种很难区分，存在不同种混用的现象，因此亟待寻求一种可操作性的检测方法，以建立更具专属性、稳定性、可控性的质量标准，确保菝葜临床用药安全可控。

发明内容

本发明的目的在于提供一种菝葜水溶性成分的含量检测方法，该方法精密度、稳定性、重现性良好，有利于菝葜的质量控制和保障临床安全用药。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种菝葜水溶性成分的含量检测方法，其中，所述的含量检测方法为检测菝葜药材中绿原酸和/或HeliciosideA的含量。

本发明人根据菝葜临床多以水煎入药的特点，选择从菝葜水溶性成分入手，首次从菝葜中分离得到绿原酸和HeliciosideA两个代表性水溶性成分，而且绿原酸也是公认具有广谱抗菌效果的活性成分，与菝葜在临床上用于抗菌消炎的作用是相关的，故以此作为药效成分控制菝葜药材质量，具有较好的质量药效相关性。